Brain Tumor Stem Cell (BTSC) Neurosphere Invasion Assay: Ein In-vitro-Assay zur Analyse der Wirkung einer medikamentösen Behandlung auf die BTSC-Invasion aus der Neurosphäre

Hirntumor-Stammzellen oder BTSCs - eine Untergruppe von Zellen innerhalb von Hirntumoren - besitzen Selbsterneuerungsfähigkeiten und tragen zur Tumorprogression und Therapieresistenz bei. Um die Wirkung von Arzneimitteln auf die BTSC-Invasion in vitro zu bestimmen, beginnen Sie mit BTSC-Suspensionen in einem geeigneten Medium in Kulturflaschen. Behandeln Sie eine der Suspensionen mit dem gewünschten Medikament.

Inkubieren Sie die Kolben. Die Medienkomponenten fördern die Zellproliferation. Die Zellen bleiben in der Schwebe und bilden dadurch kugelförmige Cluster, die Neurosphären genannt werden. Wenn Sie die gewünschte Größe erreicht haben, sammeln Sie die Neurosphären. Lassen Sie sie durch die Schwerkraft sedimentieren und entfernen Sie das Medium. Dann resuspendieren Sie die unbehandelten und medikamentös behandelten Neurosphären in gekühlten Medien, die ein geeignetes extrazelluläres Matrixprotein und das Medikament enthalten.

Plattieren Sie die Suspensionen in einer gekühlten Multiwell-Platte. Lassen Sie die Neurosphären zum Bohrlochboden sedimentieren, um eine bessere Bildgebung zu ermöglichen. Als nächstes inkubieren Sie für die Matrixproteinpolymerisation und betten die dari