Mausisches Ischiasnerv-Modell der perineuralen Invasion oder PNI: Extraktion und Verarbeitung des Ischiasnervs zum Verständnis der Invasion durch Krebszellen

Krebszellen können sich von ihrem Ursprungsort entfernen und in die umliegenden Nerven eindringen, was als perineurale Invasion oder PNI bezeichnet wird. PNI wird im Tiermodell beobachtet, indem Krebszellen in einen wichtigen Nerv wie den Ischiasnerv injiziert werden, der dann extrahiert wird, um das Ausmaß der Invasion zu untersuchen.

Bereiten Sie zunächst eine euthanasierte Maus, der zuvor Krebszellen injiziert wurden, in Bauchlage vor. Entfernen Sie die Nähte von der Hintergliedmaße - der Stelle, an der Tumorzellen injiziert werden, um den Ischiasnerv freizulegen, der die Muskeln der Hintergliedmaßen innerviert.

Trennen Sie mit einer Schere die Muskeln und legen Sie den darunter liegenden Ischiasnerv frei. Präpariere die Nervenenden, um sie vom Körper zu isolieren. Verwenden Sie nun einen Messschieber, um das makroskopische Ausmaß der Invasion von Krebszellen zu messen und aufzuzeichnen.

Legen Sie anschließend den präparierten Nerv in ein Einbettungsmedium, um die Probenvorbereitung bei niedrigen Temperaturen zu ermöglichen. Schneiden Sie mit einem Kryostat-Mikrotom dünne Abschnitte des eingebetteten Nervs ab und legen Sie sie auf einen Objektträger. Färben Sie den Objektträger