Erzeugung von Mikrotumoren: Eine In-vitro-Kulturtechnik zur Kultivierung von 3D-Mikrotumoren zur Analyse des Ansprechens auf eine medikamentöse Behandlung

Mikrotumoren - dreidimensionale in vitro Tumorzellaggregate - ahmen die in vivo Tumormikroumgebung genau nach und dienen als vielversprechende Plattformen für die Bewertung der Wirksamkeit von Medikamenten. Um Mikrotumoren zu erzeugen, beginnen Sie mit einer gleichmäßigen Suspension von Tumorzellen aus dem Patienten.

Als nächstes verdünnen Sie die Zellsuspension mit dem gewünschten Volumen einer gekühlten extrazellulären Matrix oder ECM aus dem Menschen. Pipettieren Sie kleine Volumina dieses Zell-Matrix-Gemisches auf eine maßgeschneiderte Metallplatte, die Stifte mit einer hydrophoben Beschichtung enthält. Die hydrophobe Beschichtung auf den Pins ermöglicht es den Tröpfchen, ihre kugelförmige Form beizubehalten.

Inkubieren, um die Gelierung der EZM zu erleichtern und die Zellen darin einzubetten. Übertragen Sie nun die in die Zellen eingebetteten Gelkügelchen auf eine großvolumige Kulturplatte, die ein geeignetes Medium enthält. Inkubieren Sie für die gewünschte Dauer. In Kultur beginnen die verkapselten Zellen innerhalb der EZM-Matrix zu aggregieren, was eine Umgebung für unstimuliertes Zellwachstum bietet.

Darüber hinaus diffundieren die Medienkomponenten durch die Matrix und fö