JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Krebsforschung
0 Aufrufe • 5:43 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie die Elektroporation, indem Sie eine Glaspipette mit der gewünschten Plasmidlösung entnehmen. Befestigen Sie es an einem Mikropipettenhalter, der mit einer Silberdrahtelektrode ausgestattet ist, und stellen Sie sicher, dass die Elektrode in die Mikropipette eingeführt wird. Nehmen Sie eine Elektroporationskammer, in der sich ein ultradünner Hippocampus-Schnitt befindet, der in künstliche Zerebrospinalflüssigkeit getaucht ist.
Tauchen Sie die Masseelektrode in die in der Kammer vorhandene Flüssigkeit ein, um sie anschließend zu elektroporieren. Senken Sie die Pipettenspitze in die Elektroporationskammer ab und notieren Sie den Ausgangswiderstand. Positionieren Sie die Pipettenspitze mit einem Mikroskop in der Nähe der Zielzelle. Sobald die Pipette mit der neuronalen Membran in Kontakt kommt, steigt ihr Widerstand stark an.
Wenden Sie positiven Luftdruck an, um eine kleine Einstülpung in der neuronalen Membran zu erzeugen. Wenden Sie schnell einen leichten Sog an, um die Membran nach oben zu drücken, wodurch eine lose Abdichtung zwischen der Pipettenspitze und der Membran entsteht. Wiederholen Sie diesen Vorgang noch einige Male, um die Membran zu konditionieren und eine
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