Isolierung von zirkumvallaten Papillen (CVP) Epithel aus Mausmodell: Ein enzymatisches Verfahren zur Trennung von CVP-Epithel aus der Mauszunge

Die dorsale Oberfläche der Mauszunge ist mit drei Hauptarten von erhabenen Vorsprüngen bedeckt, die Papillen genannt werden, nämlich pilzförmige, zirkumvallate und fadenförmige Papillen. Die zirkumvallaten Papillen (CVP), die aus epithelialen Gräben bestehen, in denen sich die Geschmacksknospen befinden, werden von einer Bindegewebsschicht gestützt - der Lamina propria.

Um das ZVP-Epithel zu isolieren, beginnen Sie mit einer euthanasierten Maus in Rückenlage. Als nächstes schneiden Sie die Wangen ein und präparieren das dicke Gewebeband - das Zungenbändchen - um die Zunge vom Boden der Mundhöhle zu trennen. Die herausgeschnittene Zunge in eine Schüssel mit gekühltem Puffer geben.

Schneide dann den vorderen Teil der Zunge aus. Injizieren Sie vorsichtig einen Verdauungscocktail mit Dispase- und Kollagenase-Enzymen in den subepithelialen Raum der ZVP-Region, zwischen dem Epithel und dem darunter liegenden Gewebe. Ziehen Sie die Nadel zurück, während Sie die Suspension in den Bereich injizieren.

Inkubieren Sie die Zunge für die entsprechende Dauer. Dispasen und Kollagenasen verdauen die extrazellulären Matrixproteine im Bindegewebe und erleichtern so die Trennung des ZVP-Epithels vom G