Generierung eines Mausmodells des Myokardinfarkts: Ein chirurgisches Verfahren zur dauerhaften Ligatur der linken vorderen absteigenden Koronararterie im Mausmodell

Bereiten Sie zunächst eine betäubte Maus in Rückenlage vor. Machen Sie einen Längsschnitt in den Hals und verschieben Sie die Speicheldrüsen. Trennen Sie als Nächstes die Faszie - eine Bindegewebsschicht, die die Gurtmuskulatur umgibt - um die darunter liegende Luftröhre freizulegen.

Führen Sie durch den Mund eine Intubationskanüle ein und bestätigen Sie das genaue Einführen der Luftröhre über den Schnitt. Schließen Sie die Kanüle an das Beatmungsgerät an, das auf die gewünschten Parameter eingestellt ist, die eine ausreichende Belüftung der Maus gewährleisten.

Positionieren Sie nun die Maus in einer rechten seitlichen Dekubitusposition. Schneiden Sie die Haut zwischen den linken Brustmuskeln ein und trennen Sie die Faszien. Stellen Sie das Beatmungsgerät auf positiven endexspiratorischen Druck oder PEEP-Einstellung um.

Führen Sie eine linksseitige Thorakotomie im dritten Interkostalraum durch - ein Schnitt zwischen der dritten und vierten Rippe. Der Überdruck in den Atemwegen während des PEEP-Modus verhindert einen Alveolarkollaps während der Thorakotomie.

Entfernen Sie nach dem Zugang zum Herzen das Perikard. Identifizieren Sie die linke anteriore absteigende oder LAD-Koronararterie - ein leuchtend rotes Gefäß, das von der linken Koronararterie abzweigt. Die LAD-Arterie versorgt den größten Teil des linken Ventrikels mit Blut.

Binden Sie die LAD-Arterie proximal zu den linken Vorhöfen. Diese Ligatur der Arteria LAD führt zu einer Pale des Ventrikels. Schließen Sie den Schnitt. Bringen Sie das Tier in seinen Käfig zurück. Die permanente LAD-Arterienligatur behindert den Blutfluss und die Sauerstoffversorgung der Herzmuskulatur, was zu deren Schädigung und Tod führt.

Verwenden Sie einen Elektrorasierer, um eine narkotisierte 25 bis 30 Gramm schwere männliche C57BL/6-Maus schnell am Hals und an der linken Seite des Brustkorbs zu rasieren. Bestätigen Sie eine mangelnde Reaktion auf das Einklemmen der Zehen. Tragen Sie Salbe auf die Augen des Tieres auf. Legen Sie die Maus in Rückenlage auf ein Heizkissen und legen Sie eine kleine Mullkompresse unter den Kopf, um eine Überhitzung der Augen zu vermeiden.

Sichern Sie die Gliedmaßen mit Klebeband. Führen Sie eine Schlaufe aus 5-0 Seidennaht unter den oberen Schneidezähnen durch und befestigen Sie das Ende der Schlaufe auf dem Heizkissen, um den Mund während der Kanülierung offen zu halten. Tragen Sie die Enthaarungscreme auf die vorrasierten Stellen auf und massieren Sie sie 1 Minute lang sanft mit einem Wattestäbchen ein.

Entfernen Sie das überschüssige Fell und die Creme mit Gaze und reinigen Sie die freiliegende Haut mit Tropfen 0,9% iger Kochsalzlösung und Gaze. Tragen Sie sterile Gazestücke auf den rasierten Hals und Thorax auf und tränken Sie die Gaze mit Jodopovidon. Stellen Sie das Beatmungsgerät auf ein Atemzugvolumen von 7 Millilitern pro Kilogramm und eine Beatmungsrate von 140 Hüben pro Minute ein.

Bewegen Sie die Maus unter ein mikrochirurgisches Stereomikroskop. Halten Sie die Haut in der Mitte des Rachens, machen Sie einen 0,5 Zentimeter langen Schnitt entlang der Schwanz-/Kopflinie und trennen Sie die Lappen der Speicheldrüse. Trennen Sie mit einer gebogenen Pinzette vorsichtig die Faszie des Musculus sternohyoideus, bis Kehlkopf und Luftröhre sichtbar sind. Sichern Sie dann die Ränder der Öffnung mit Retraktoren, die an Gummibändern befestigt sind.

Ziehen Sie dann die Zunge vorsichtig zur Seite und führen Sie mit einer Pinzette die stumpfe Innennadel einer 16-Gauge-Kanüle in die Luftröhre ein. Visualisieren Sie ein korrektes Einführen in die Luftröhre durch den Rachenschnitt und verbinden Sie die Kanüle mit dem Beatmungsgerät. Legen Sie sterile 0,9%ige Kochsalzlösung, die mit Jodopovidon-getränkter Gaze ergänzt ist, auf den Schnitt, um das Gewebe während der Operation feucht zu halten.

Legen Sie dann den Auspuffschlauch in Wasser. Das Vorhandensein von Blasen deutet auf eine erfolgreiche Intubation hin. Für die Ligatur der linken vorderen absteigenden Koronararterie oder LAD bewegen Sie die Maus vorsichtig in die Dekubitusposition auf der rechten Seite und sichern Sie die linke vordere Extremität wieder in der neuen Position.

Identifizieren Sie die Linie zwischen dem linken Musculus pectoralis minor und dem Musculus major und machen Sie einen schrägen Hautschnitt von 1 Zentimeter entlang der Linie. Trennen Sie mit einer stumpfen Präparier-Mikroschere die Faszien der Brustmuskeln, ohne das Gewebe zu schneiden, und verwenden Sie Retraktoren, die an elastischen Bändern befestigt sind, um die Trennung aufrechtzuerhalten.

Stellen Sie den Ventilator auf einen positiven endexspiratorischen Druck von 3 Zentimetern Wasser ein. Verwenden Sie eine stumpfe Pinzette, um die Brusthöhle am dritten Interkostalraum zwischen der dritten und vierten Rippe zu öffnen. Platzieren Sie zwei Retraktoren in den Brustkorb, einen auf jeder Rippe, und entfernen Sie mit einer gebogenen feinen Pinzette vorsichtig das Perikard, ohne Herz und Lunge zu schädigen.

Lokalisieren Sie den LAD als oberflächliche, hellrote Linie, die vom Rand der linken Ohrmuschel zur Spitze verläuft. Verwenden Sie einen Nadelhalter, um eine 7-0-Seidennaht unter den LAD zu führen, 2 bis 3 Millimeter unterhalb des linken Vorhofs. Ziehen Sie langsam an der Seide, um ein Reißen des Herzgewebes zu vermeiden, und binden Sie die Ligatur mit drei Knoten. Der untere linke Teil des linken Ventrikels wird nach der Ligatur sofort blass.

Lösen Sie nun die Rippenretraktoren, halten Sie die dritte Rippe mit einer Pinzette fest und machen Sie zwei Durchgänge mit der 6-0-Seidennaht unter der dritten und vierten Rippe. Geben Sie drei Tropfen 37 Grad Celsius und 0,9% ige Kochsalzlösung auf die Öffnung und schließen Sie das Auslassrohr für 2 oder 3 Atemzyklen, um die Lunge richtig aufzublasen.

Ziehen Sie die Naht mit zwei Würfen fest und sichern Sie sie und lösen Sie die Retraktoren, die die Muskeln halten, damit die Muskeln wieder an ihre richtige anatomische Position zurückkehren können. Schließen Sie dann die Brusthaut mit zwei Stichen und zwei Würfen 5-0 Nahtseide. Verschließen Sie die Halshaut mit einem Stich, einer 5-0 Nahtseide und zwei Überwürfen.