Intravitale Bildgebung: Eine Methode zur Beobachtung der Bauchspeicheldrüse der Maus auf zellulärer Ebene durch ein stabilisiertes Bildgebungsfenster

Bei der intravitalen Bildgebung werden die Zellen eines lebenden Tieres durch ein Bildgebungsfenster sichtbar, das in das Tier implantiert wird. Es ermöglicht die Langzeitbeobachtung der zellulären Dynamik, ohne deren Funktionen zu beeinträchtigen.

Nehmen Sie zunächst eine anästhesierte transgene Maus, der zuvor ein Pankreas-Bildgebungsfenster implantiert wurde, das auf einer Metallplatte ruht. Die Basisplatte trennt die Bauchspeicheldrüse räumlich vom Darm und reduziert so Bewegungsartefakte aus physiologischen Bewegungen wie der Peristaltik.

Die transgene Maus exprimiert grün fluoreszierendes Protein oder GFP unter dem Insulin-Genpromotor, der in Betazellen von Inselzellen in der Bauchspeicheldrüse exprimiert wird.

Halten Sie anschließend den Mausschwanz fest und sprühen Sie Desinfektionsmittel, um Oberflächenverunreinigungen zu entfernen. Führen Sie einen Katheter in die seitliche Schwanzvene ein. Injizieren Sie eine Lösung mit Antikörpern, die mit einer rot fluoreszierenden Sonde markiert sind, in die Schwanzvene. Diese Antikörper binden an die Zellen, die die Blutgefäße auskleiden, und färben sie rot.

Schalten Sie nun die Maus auf ein Intravitalmikroskopie-Setup. Setzen Sie da