0 Aufrufe • 3:28 Min. • July 8th, 2025
Bei Säugetieren kann Fettgewebe oder Fettdepot - ein spezialisiertes Bindegewebe, das hauptsächlich aus Fettzellen oder Adipozyten besteht, in zwei Haupttypen unterteilt werden - weißes Fettgewebe oder WAT und braunes Fettgewebe oder BAT.
Das WAT besteht aus weißen Adipozyten mit wenigen Mitochondrien und einem einzigen Lipidtröpfchen und speichert Energie. Die wichtigsten WATs sind die subkutane inguinale WAT und die viszerale WAT.
Die BAT besteht aus braunen Adipozyten mit zahlreichen Mitochondrien und Lipidtröpfchen und reguliert die Körpertemperatur. Dieses Gewebe ist im interscapularen, zervikalen und axillären Bereich zu finden.
Um dieses Fettgewebe zu isolieren, beginnen Sie mit einem euthanasierten Mauswelpen in der linken Seitenlage. Machen Sie als nächstes einen Schnitt in der Bauchhaut. Ziehen Sie die Haut sanft in Richtung der Gliedmaßen zurück.
Identifizieren Sie die subkutane WAT, die sich in der innersten Hautschicht vor dem oberen Segment der Hintergliedmaßen befindet. Schneiden Sie das dünne, längliche subkutane WAT vorsichtig unter der Haut heraus.
Positionieren Sie nun den Maus-Welpen in Bauchlage. Schnitten Sie die Rückenhaut vom Schulterblatt oder dem interscapularen Bereich in Richtung Kopf. Lokalisieren Sie die interscapularäre BAT - das tiefrote Gewebe zwischen den Schulterblättern. Entfernen Sie vorsichtig die interscapulare BAT.
Waschen Sie das entnommene Fettgewebe mit einem geeigneten gekühlten Puffer. Lagern Sie das Fettgewebe in Röhrchen mit Puffer bei niedrigen Temperaturen bis zur Weiterverarbeitung.
Um subkutanes weißes Fettgewebe zu sammeln, schneiden Sie die Haut um den Bauch eines euthanasierten Neugeborenen und ziehen Sie die Haut vorsichtig unter die Beine. Ohne Hautgewebe zu sammeln, entnehmen Sie vorsichtig das Fettdepot, das als klares oder weißes, dünnes, längliches Gewebe erscheint, das an der Innenseite der Haut oder auf dem Quadrizeps befestigt ist. Spülen Sie das entnommene Depot in PBS und geben Sie das Fettgewebe in ein 1,5-Milliliter-Röhrchen mit 250 Mikrolitern PBS und 200 Mikrolitern 2X-Isolationspuffer auf Eis.
Um interscapulares braunes Fettgewebe zu sammeln, ziehen Sie die Haut von den Schulterblättern über den Kopf und heben Sie das tiefrotbraune Fettgewebe an, das sich zwischen den Schulterblättern befindet. Machen Sie vorsichtig Schnitte rund um das Fettgewebe, um es vom Körper zu lösen, und überprüfen Sie das Gewebe auf Konsistenz und Farbe. Legen Sie das Gewebe nach dem Spülen in ein zweites 1,5-Milliliter-Röhrchen mit 250 Mikrolitern PBS und 200 Mikrolitern 2X-Isolationspuffer auf Eis.