JoVE Encyclopedia of Experiments
Biologie
0 Ansichten • 3:58 Min. • July 8th, 2025
Die apikale Resektion einer neugeborenen Maus ist ein Verfahren zur Entfernung der linksventrikulären Spitze des Herzens. Die daraus resultierende Verletzung aktiviert neonatale Herzmakrophagen, die zelluläre Prozesse für die Herzreparatur fördern. Diese Regenerationsfähigkeit wird jedoch im Erwachsenenalter eingeschränkt, was zu Herzinsuffizienz führt. Die Transplantation von neonatalen Herzmakrophagen in das Herz eines Erwachsenen kann die Herzfunktion wiederherstellen.
Setzen Sie zunächst eine neugeborene Maus auf Eis, um eine Unterkühlung auszulösen, die die Maus betäubt. Übertragen und bereiten Sie die bewusstlose Maus auf einer chirurgischen Plattform vor. Schneiden Sie nun unter einem Stereoskop die linke Seite des Brustkorbs horizontal ein und trennen Sie die darunter liegenden Muskeln, um das Herz sichtbar zu machen.
Üben Sie Druck auf Brust und Bauch aus, um das Herz nach außen zu verkörpern. Schneiden Sie vorsichtig das ventrikuläre Spitzengewebe ab, bis die Blutung die linke Ventrikelkammer freilegt. Drücken Sie das Herz mit einem Wattestäbchen zurück in die Brusthöhle. Nähen Sie die eingeschnittene Brustwand. Tragen Sie Gewebekleber auf, um die Haut zu verbinden. Übertragen Sie anschließend die Maus auf eine Heizdecke, um die Unterkühlung zu stoppen. Bringen Sie dann die operierte Neugeborenenmaus in den Käfig ihrer Mutter, um sich schnell zu erholen.
Nach der apikalen Resektion reichern sich die residenten Herzmakrophagen an der verletzten Stelle an. Anschließend können diese Makrophagen für die Transplantation in das Herz des Erwachsenen isoliert werden.
Beginnen Sie mit dem Vorkühlen der Bedienplattform Bronze über Nacht bei minus 20 Grad Celsius. Nehmen Sie die betäubte Maus aus der Eisbox und legen Sie sie auf die Plattform. Verankern Sie die Maus in Rückenlage mit medizinischem Klebeband. Stellen Sie die Operationsplattform mit der Maus unter ein Stereoskop und desinfizieren Sie die Mausbrust mit einem Vorbereitungspad, das mit Betadin und 70% Alkohol getränkt ist.
Schneiden Sie die Haut mit einem 1 Zentimeter langen Schnitt im vierten Interkostalbereich der Brusthöhle ein und trennen Sie die Interkostalmuskulatur mit einer mikrochirurgischen Schere, bis das Herz zugänglich ist. Drücken Sie abwechselnd mit Hilfe von zwei Zangen auf Brust und Bauch, bis das Herz ohne mechanische Beschädigung aus der Brust herausragt.
Setzen Sie die Rippen unterhalb und oberhalb des kleinen Schnitts als natürliche Fixierung an, um das Herz ruhig zu stellen. Lokalisieren Sie die Spitze des linken Ventrikels und schneiden Sie mit einer Iridektomieschere einen Durchmesser von 1 Millimeter des ventrikulären Apexgewebes. Vergewissern Sie sich, dass die linksventrikuläre Kammer freiliegt und zu nässen beginnt.
Drücken Sie das Herz mit einem Wattestäbchen vorsichtig zurück in die Brusthöhle. Nähen Sie die Muskeln, Rippen und die Haut mit 8-0 Prolin näht und reinigt die Maus nach der Operation gründlich. Übertragen Sie die Maus von der Operationsplattform auf eine 37-Grad-Heizdecke, um den Körper unmittelbar nach der Operation aufzuwärmen.
Bestätigen Sie die Anabiose der Maus, indem Sie auf die Anzeichen einer Wiederherstellung der spontanen Atmung, eine Veränderung der Hautfarbe von blass nach rosa und die Bewegung der Gliedmaßen achten. Bringen Sie die operierte Maus zurück zu ihrer Mutter, sobald sie sich erholt hat. Mischen Sie die operierte Maus und das Nistmaterial ihrer Mutter, falls erforderlich.