Modell des Mausschwanz-Lymphödems: Eine In-vivo-Technik zur Erzeugung eines anhaltenden Lymphödems beim Mausschwanz

In der Hautdermis sind Lymphgefäße vorhanden, deren Funktion darin besteht, überschüssige interstitielle Flüssigkeit aus dem Gewebe zu entfernen. Eine Schädigung der Lymphgefäße führt zu einer übermäßigen Flüssigkeitsansammlung im interstitiellen Raum und zu einer Zunahme der subkutanen Ablagerung von Faser- und Fettgewebe. Diese Veränderungen führen zu einem Lymphödem.

Um ein Lymphödem im Mausschwanz zu erzeugen, nehmen Sie eine betäubte Maus und bringen Sie sie in Bauchlage. Führe eine umfassende Hautexzision in voller Dicke an einer entsprechend entfernten Stelle durch, distal zur Basis des Schwanzes. Schnitte eine weitere Stelle am Schwanz ein, die dem ersten Schnitt unterlegen ist.

Machen Sie einen vertikalen Hautschnitt, der die beiden vorgefertigten Schnitte verbindet. Mit diesem Schnitt das darüber liegende Hautpflaster herausschneiden, um die Seitenvenen und Lymphgefäße freizulegen.

Nehmen Sie eine Spritze mit farbigem Tracking-Farbstoff und injizieren Sie ihn subkutan in der Nähe des Schwanzendes, wodurch die Lymphgefäße blau erscheinen. Durchschneiden Sie die Lymphgefäße, umhüllen Sie die Wundstelle und überwachen Sie die Maus für die gewünschte Zeitdauer.

Die

Mikrodissektion stoppt den Lymphfluss in den Gefäßen und die Flüssigkeit sammelt sich im Geweberaum. Folglich wird ein anhaltendes Lymphödem als Schwellung des Mausschwanzes dorsal zur Operationsstelle beobachtet.

Positionieren Sie zunächst die 8 Wochen alte sedierte Maus mit dem Heck und bereiten Sie den Schwanz mit 70%igem Isopropylalkohol vor. Verwenden Sie einen Messschieber, um den Heckdurchmesser in 5-Millimeter-Schritten zu messen, beginnend 20 Millimeter von der Basis des Hecks. Markiere einen 3 Millimeter großen Umfangsschnitt am Schwanz 20 Millimeter von der Basis entfernt.

Führen Sie unter chirurgischer mikroskopischer Vergrößerung eine sorgfältige 3-Millimeter-Hautexzision in voller Dicke durch, wobei das gesamte darunter liegende Gefäßsystem intakt bleibt. Schneiden Sie eine obere Umfangsmarkierung ein, zuerst durch die Dermis, gefolgt von einem umlaufenden Schnitt in voller Dicke 3 Millimeter distal des ersten Schnitts. Machen Sie einen senkrechten vertikalen Schnitt in voller Dicke, um die beiden Schnitte zu verbinden, und verwenden Sie dann einen gezahnten feinen Tonabnehmer, um eine Eintrittskante zu greifen, und präparieren Sie mit einer Mikroschere tief in der avaskulären Ebene zur Dermis und oberflächlich zur Vena adventitia.

Injizieren Sie 0,1 Milliliter 1 % Isosulfanblau subkutan proximal zur Schwanzspitze. Identifizieren Sie die beiden Lymphkanäle, die aufgrund der Injektion blau erscheinen, die an die seitlichen Schwanzvenen angrenzen. Durchtrennen Sie die Lymphgefäße vorsichtig und präparieren Sie eine Ebene zwischen der Seitenvene und der Lymphvene mit einer geraden mikrochirurgischen Schere. Führen Sie die Spitze einer Scherenklinge zwischen das Lymphgefäß und die Seitenvene und schließen Sie die Klingen, um das Lymphgefäß zu durchtrennen. Wenn Sie fertig sind, verbinden Sie die Schwanzwunde mit einem sterilen, haftenden Klarverband.