Myofaserisolierung: Eine Technik zur Gewinnung einzelner Myofasern aus entnommenen Mausmuskeln Extensor Digitorum longus (EDL)

Beginnen Sie mit einer euthanasierten Maus in Rückenlage. Sterilisieren Sie seine Hintergliedmaßen. Entfernen Sie operativ die Haut und die Faszien – eine dünne Hülle aus Bindegewebe unter der Haut –, um die darunter liegenden Muskeln der Hintergliedmaßen freizulegen.

Lokalisieren Sie den Musculus tibialis anterior oder TA auf der lateralen Seite der Tibia. Halten Sie die distale TA-Sehne fest und lösen Sie den Muskel vom darunter liegenden Gewebe. Schneiden Sie den Muskel in der Nähe des Knies, um den TA-Muskel zu entfernen, und legen Sie den darunter liegenden Musculus extensor digitorum longus oder EDL frei, der sich im vorderen Kompartiment der Hintergliedmaße befindet.

Schnitten Sie die distale EDL-Sehne ein und ziehen Sie den EDL-Muskel in Richtung Knie. Schneiden Sie die proximale EDL-Sehne ab, um den EDL-Muskel zu entfernen. Den entnommenen Muskel in ein Röhrchen mit vorgewärmtem Medium mit Kollagenase-Enzymen geben und für die entsprechende Dauer inkubieren. Kollagenasen bauen das Bindegewebe ab, das jede Muskelfaser oder Myofaser innerhalb des Muskels umgibt. Durch diesen Verdauungsschritt werden die Myofasern aus der inneren Schicht des Muskels gelöst.

Nach der Inkubatio