Kultivierung des vorderen Augenabschnitts: Eine Methode zur Kultivierung des hornhauttragenden vorderen Augenabschnitts des Schweineauges

Beginnen Sie für die Kultivierung der vorderen Augenpartie mit einer geeigneten Kulturschale. Die Kulturschale hat eine erhöhte Bühne in der Mitte, die mit zwei Flüssigkeitsanschlüssen für den Zu- und Abfluss verbunden ist.

Legen Sie zunächst ein frisches vorderes Schweineaugensegment mit Hornhaut über die Bühne. Legen Sie anschließend einen Klemmring über das Augensegment und befestigen Sie diesen. Als nächstes bereiten Sie ein Perfusionssetup vor, das eine Spritze umfasst, die mit einem geeigneten Nährmedium gefüllt ist. Verbinden Sie die Spritze mit einem Ventil, einem Filter und einem Schlauch mit einer gebogenen Nadelnabe am anderen Ende.

Bereiten Sie ein ähnlich zusammengesetztes Reservoir mit einer leeren Spritze vor. Verbinden Sie nun die Nadelnaben der Perfusion und des Reservoir-Setups mit den Zu- bzw. Abflussanschlüssen. Perfundierten Sie das Medium vorsichtig und lassen Sie den vorderen Augenabschnitt aufblasen.

Setzen Sie die Perfusion fort und lassen Sie die Blasen und das überschüssige Medium in das Reservoir fließen. Inkubieren Sie die Kulturschale anschließend in der gewünschten Höhe und unter physiologischen Standardbedingungen. Das Ergebnis ist ein dreidimensiona