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Der Augapfel wird hauptsächlich über die Arteria ophthalmica durchblutet. Wenn die Arteria ophthalmica entlang des Sehnervs verläuft, verzweigt sie sich und bildet mehrere kurze hintere Ziliararterien (SPCAs).
An der hinteren Seite des Augenglobens gabelt sich die SPCA in zwei Arten von Ästen. Die paraoptischen Äste treten in der Sklera - der äußersten Augenhülle - in der Nähe des Sehnervs ein. Im Gegensatz dazu durchstechen distale SPCAs die Sklera in geringem Abstand vom Sehnerv.
Um SPCAs zu isolieren, nehmen Sie ein frisch präpariertes Schweineauge, an dem der Sehnerv und extraokulare Gewebereste befestigt sind. Tauchen Sie den Augapfel in eine Präparierkammer, die einen geeigneten physiologischen Puffer enthält.
Präpariere die umliegenden Muskelschichten, um die Arterien um den Augenglobus herum sichtbar zu machen. Machen Sie einen vollständigen umlaufenden Schnitt am Augenballen, um das Auge in die vordere und hintere Hälfte zu trennen. Entfernen Sie die Glaskörperschicht aus der hinteren Hälfte des Auges.
Visualisieren Sie die hintere Hälfte des Auges, um den Sehnerv und das angrenzende retrobulbäre Gefäßsystem - die Blutgefäße hinter dem Augapfel - zu lokalisieren. Lokalisieren Sie die paraoptischen und distalen Äste der kurzen hinteren Ziliararterien.
Schneiden Sie diese arteriellen Segmente heraus und waschen Sie sie mit dem gewünschten Puffer, um Verunreinigungen und Blutreste zu entfernen. Bewahren Sie SPCAs für weitere nachgelagerte Analysen auf.
Unmittelbar nach dem Tod wurden frische Schweineaugen zusammen mit dem Sehnerv und extraokularem Gewebe aus dem örtlichen Schlachthof gewonnen. Legen Sie den Augengloben in eine Präparierkammer mit eiskaltem Krebs-Henseleit-Puffer. Schneiden Sie die umliegenden Muskeln und das Gewebe vorsichtig mit einer scharfen Mayo-Schere ab.
Machen Sie einen Schnitt mit einem Skalpell und schneiden Sie den Globus entlang der Äquatorebene mit einer scharfen Mayo-Schere, bis das Auge in die vordere und hintere Hälfte geteilt ist. Entfernen Sie so viel Glaskörper wie möglich aus der hinteren Hälfte des Auges mit einer Zange nach Standardmuster.
Nachdem Sie die hintere Hälfte des Auges mit Präpariernadeln vorsichtig festgesteckt haben, schneiden Sie das Bindegewebe, das den Sehnerv umgibt, vorsichtig ab, um das darunter liegende retrobulbäre Gefäßsystem mit einer Federschere von Student Vannas freizulegen.
Isolieren Sie das Paar der Arteria opticus und der distalen kurzen hinteren Arteria ciliaris zusammen mit dem umgebenden Bindegewebe mit einer Präzisionspinzette vom Typ 5 und einer Kapsulotomieschere von Vannas. Entfernen Sie vorsichtig das Bindegewebe aus den Arteriensegmenten mit einer extra feinen Pinzette und einer Schere, bevor Sie die isolierten Arterien mit eiskaltem PBS spülen, um Verunreinigungen und Blutrückstände zu entfernen.