Hydrodynamischer Gentransfer: Eine Technik zur In-vivo-Transfektion von exogener DNA in murinen Hepatozyten durch Injektion von Schwanzvenen

Um den hydrodynamischen Gentransfer durchzuführen, nehmen Sie zunächst eine Spritze, die mit einer Lösung auf Kochsalzlösung gefüllt ist, die rekombinante Plasmide enthält, die das gewünschte Gen tragen. Nehmen Sie anschließend ein Mausmodell und injizieren Sie schnell eine große Menge Plasmidlösung an der Basis des Schwanzes, wobei Sie sicherstellen, dass die Plasmidlösung intravenös in die Schwanzvene injiziert wird.

Die unter Druck stehende Injektion eines großen Volumens von Plasmiden erzeugt eine mechanische Kraft, die als hydrodynamische Kraft bezeichnet wird und den intravaskulären Druck in der unteren Hohlvene erhöht - einer Vene, die sauerstoffarmes Blut zum Herzen transportiert.

Ein großes Flüssigkeitsvolumen führt zu einer Stauung im rechten Ventrikel des Herzens und erzwingt die Umkehrung in die Blutrichtung. Dieser Schritt zwingt die Plasmidlösung, in die Lebervene einzudringen, die sie zur Leber transportiert.

Die Plasmide bewegen sich in den Lebersinusoiden - den Räumen in der Leber, die von den Endothelzellen ausgekleidet sind. Ein erhöhtes Blutvolumen hilft den Plasmiden, die Endothelschicht zu permeabilisieren, und hilft ihnen, in die Nähe der umgebenden Hepatozyt