JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Biologische Techniken
0 Aufrufe • 3:59 Min. • July 8th, 2025
Für die elektroporationsbasierte Verabreichung von Plasmid-DNA in primäre neuronale Zellen beginnen Sie mit einer Suspension der Zellen in geeigneten Elektroporationsmedien. Fügen Sie fluoreszierende Protein-kodierende Plasmid-DNA hinzu, um die Elektroporationsmischung vorzubereiten.
Übertragen Sie das Elektroporationsgemisch vorsichtig in eine Elektroporationsküvette und vermeiden Sie dabei Luftblasen, die die Elektroporationseffizienz negativ beeinflussen könnten. Übertragen Sie die Küvette in den Küvettenhalter des Elektroporators. Stellen Sie die Elektroporationsparameter ein. Initiieren Sie die Elektroporation.
Die angelegten kurzen elektrischen Hochspannungsimpulse über die Zellmembran verursachen eine differentielle Ladungsakkumulation auf beiden Seiten der Membran, wodurch das Transmembranpotential, die Spannung über die Zellmembran, erhöht wird.
Wenn das induzierte Transmembranpotential das Abbaupotenzial der Lipiddoppelschicht übersteigt, destabilisiert sich die Lipiddoppelschicht mit der lokalisierten Konfigurationsänderung und bildet vorübergehende hydrophile Poren auf der Zellmembran. Die Poren mit ausreichender Größe bieten einen Weg für Plasmid-DNA, um in das Zytopla
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