JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Biologische Techniken
0 Aufrufe • 2:44 Min. • July 8th, 2025
Die Lebersteatose ist ein pathologischer Zustand, der durch eine übermäßige Ansammlung von Fetten in den Hepatozyten - einem prominenten Leberzelltyp - gekennzeichnet ist. Die Fette lagern sich in Form von unterschiedlich großen Lipidtröpfchen im Zytoplasma der Hepatozyten ab.
Strukturell enthält ein Lipidtröpfchen einen Kern aus neutralen, hydrophoben Fetten wie Triglyceriden und Cholesterinestern. Der Kern ist von einer Phospholipid-Monoschicht umgeben, die mit verschiedenen Proteinen verziert ist.
Um die Fettablagerung zu visualisieren, nehmen Sie eine Multi-Well-Platte, die eine adhärente Hepatozytenkultur enthält. Die Zellen werden mit einem steatogenen Medium vorbehandelt, um die Ansammlung von Lipidtröpfchen in ihnen zu induzieren.
Fügen Sie die gewünschte Konzentration von Paraformaldehyd hinzu, das in die Zellen diffundiert und die Proteine vernetzt. Dieser Schritt deaktiviert die Proteasen und erhält die Hepatozytenstruktur. Verwerfen Sie das Paraformaldehyd und fügen Sie die Öl-Rot-O-Lösung hinzu, die den in Isopropanol gelösten organischen Farbstoff enthält.
Das Isopropanol fungiert als Trägerlösungsmittel für die schwer löslichen Öl-Rot-O-Moleküle. Dies hilft den Farbs
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