Nilrot-Färbung: Eine Technik zum Nachweis und zur Quantifizierung intrazellulärer neutraler Lipide in Algen

Algen sind aquatische photosynthetische Organismen, die eine Vielzahl von Lipiden produzieren, von denen neutrale Lipide für die Biodieselproduktion unerlässlich sind.

Um neutrale Lipide nachzuweisen und zu quantifizieren, mischen Sie ein optimales Volumen aus Algensuspension und Ethanol in einer Vertiefung der schwarzen Mikrotiterplatte. Die Algenzellwand und -membran, die das Eindringen der meisten Flecken verhindern, werden durchlässig, wenn sie Ethanol ausgesetzt werden. Kombinieren Sie anschließend das Ethanol mit einem fettlöslichen Fluoreszenzfarbstoff - Nilrot. Geben Sie diese Mischung in die algenhaltige Wanne.

Legen Sie die Mikrotiterplatte in ein Spektralphotometer. Stellen Sie ein Programm ein, das die Inkubation mit intermittierendem Schütteln gewährleistet, um die Interaktion zwischen dem Farbstoff und den Algen zu erleichtern.

Da Nilrot hydrophob ist, kann es das Zytoplasma nicht leicht passieren. Lösungsmittel wie Ethanol mobilisieren in Verbindung mit Nilrot den Farbstoff und helfen ihm, die im Zytoplasma dispergierten Lipidkörper zu erreichen. Nilrot dringt dann in die Lipidkörper ein und löst sich dort auf, wodurch die Lipide gefärbt werden.

Zellen mit Lipidmange