Kresylviolett-Färbung von Gewebeschnitten: Ein Färbeverfahren zur Visualisierung von Knorpel und Knochen in gefrorenen Mausembryonenschnitten

Um Knorpel- und Knochenregionen in einem Gewebeschnitt zu visualisieren, beginnen Sie mit einem Objektträger mit einem dünnen Abschnitt aus gefrorenem Mausembryogewebe

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Tauen Sie die Kryosektion kurz auf und tauchen Sie sie in eine geeignete Ethanolkonzentration, um das Kryo-Einbettungsmedium zu entfernen. Der Entfernungsschritt hilft, ein Lösen des Mediums zu verhindern, das sonst die Gewebevisualisierung während der Färbung beeinträchtigen könnte. Darüber hinaus fixiert Ethanol das Gewebe und erhält die Morphologie und Integrität des Gewebes.

Pipettieren Sie anschließend eine kresylviolette Lösung auf das Gewebe. Cresylviolett, ein positiv geladener, basischer Farbstoff, bindet an polyanionische Anteile wie Proteoglykane in der Knorpelgewebematrix. In mineralisiertem Gewebe wie Knochen reagiert es dagegen mit negativ geladenen Gruppen wie Phosphatgruppen in der Knochenmatrix.

Da es sich um einen metachromatischen Farbstoff handelt, färbt Kresylviolett verschiedene Regionen des Gewebes in Farben, die sich vom natürlichen Farbstoff unterscheiden, basierend auf seiner Wechselwirkung mit verschiedenen chemischen Bestandteilen innerhalb dieser Regionen.

Waschen Sie nun das Tuch in ein