hFTAA-Färbung von Amyloid-Ablagerungen: Eine Technik zur Visualisierung von Amyloidfibrillen unter Verwendung von Oligothiophen-basiertem Farbstoff für die Fluoreszenzbildgebung in Gewebeschnitten
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Biologische Techniken
0 Aufrufe • 3:38 Min. • July 8th, 2025
Die Ablagerung von fehlgefalteten Proteinaggregaten - die Amyloide im extrazellulären Geweberaum sind Kennzeichen verschiedener proteopathischer Erkrankungen. Diese Amyloide bestehen aus Beta-Faltblättern, die senkrecht zur Fibrillarachse ausgerichtet sind und Kreuz-Beta-Faltblatt-Wiederholungen bilden.
Um die Amyloidablagerungen mit Heptamer-Formylthiophenessigsäure oder hFTAA-Färbung nachzuweisen, nehmen Sie einen formalinfixierten, in Paraffin eingebetteten Gewebeschnitt mit Amyloidablagerungen
.Behandeln Sie die Schnitte mit Xylol, um das Gewebe zu entparaffinisieren und in den folgenden Schritten die Zugänglichkeit zur Färbung zu verbessern. Geben Sie einige Tropfen der hFTAA-Färbelösung über den Gewebeschnitt und inkubieren Sie, damit der Farbstoff in das Gewebe eindringen kann.
Das hFTAA enthält sieben konjugierte schwefelhaltige Thiopheneinheiten und terminale Carboxylgruppen, die an das Thiophen-Rückgrat gebunden sind. Diese Eigenschaften verleihen dem ungebundenen Farbstoff Flexibilität. Während der Inkubation binden die Endcarboxylgruppen des Farbstoffs über elektrostatische Wechselwirkungen an die positiv geladenen Aminosäurereste, die die hydrophobe Rille des Beta-Falt
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