JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Biologische Techniken
0 Aufrufe • 3:40 Min. • July 8th, 2025
Während der Hirnischämie verringert eine gestörte Durchblutung des Gehirns die Sauerstoff- und Nährstoffversorgung des Gewebes, was zu Hirnschäden führt. Nach einer kurzen Ischämie, wenn der Blutfluss zum Gehirn wiederhergestellt wird, führt die Reperfusion mit erhöhter Sauerstoffversorgung zu einer Überproduktion reaktiver Ionenspezies, was zu oxidativen Gewebeschäden führt, die als Ischämie-Reperfusionsschäden bekannt sind.
Um Hirnschäden nach Ischämie-Reperfusionsschäden in einem Rattenmodell zu beurteilen, wird zunächst das Rattengehirn entnommen. In einem gekühlten Puffer abspülen, um Schmutz und Blut zu entfernen. Schneiden Sie das Gehirn, um koronale Scheiben der gewünschten Dicke zu erhalten. Übertragen Sie die Scheiben vorsichtig in eine pufferhaltige Schale - mit den vorderen Flächen nach oben - für die anschließende Färbung.
Geben Sie eine Lösung aus warmem Triphenyltetrazoliumchlorid, TTC, einem wasserlöslichen Redoxfarbstoff, über die Gehirnschnitte. Inkubieren Sie unter dunklen Bedingungen, da TTC lichtempfindlich ist. TTC dringt in Zellen innerhalb des Gewebeabschnitts ein.
In lebenden Zellen reduziert das aktive mitochondriale Succinat-Dehydrogenase-Enzym in Gegenwa
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