JoVE Encyclopedia of Experiments
Biologische Techniken
0 Ansichten • 2:50 Min. • July 8th, 2025
Das Epithel des Eileiters besteht aus sekretorischen Zellen, die nährstoffreiche Flüssigkeit produzieren, und Flimmerzellen, die die in Flüssigkeit gebadete Eizelle in Richtung Gebärmutter treiben. Morphologische Veränderungen und Funktionsverluste in den Eileiterzellen sind mit Eileiterkrebs assoziiert.
Um die Morphologie der Eileiter zu visualisieren, nehmen Sie einen gewebeverschmierten Objektträger und tauchen Sie ihn in Ethanol, um seine zytologischen Merkmale zu korrigieren. Spülen Sie den Objektträger mit Wasser ab, um überschüssiges Fixiermittel zu entfernen.
Tauchen Sie nun den Objektträger in Hämatoxylin, einen kationischen Farbstoff, der die negativ geladene DNA bindet und den Zellkern blau färbt. Spülen Sie den Objektträger mit Wasser und anschließend mit Ethanol ab, um eine Überfärbung zu vermeiden.
Tauchen Sie den Objektträger anschließend in den Farbstoff Eosin Azure - eine polychrome Lösung aus Bismarckbraun, Eosin Y und Schnellgrün, gemischt mit Phosphotungssäure. Bismarckbraun fällt Phosphowolframsäure, ein Beizmittel, das von Eosin Y verwendet wird, und Fast Grün aus, um nicht-krebsartige Eileiterzellen und metabolisch aktive Krebszellen unterschiedlich zu färben.
Wiederholen Sie den Wasser-Alkohol-Spülschritt. Tauchen Sie den Objektträger zuletzt in Xylol - ein Reinigungsmittel, das die überschüssigen Fleckenbestandteile entfernt. Montieren Sie anschließend den Objektträger und visualisieren Sie ihn unter einem Mikroskop.
Das normale Epithel des Eileiters erscheint als organisierte Schicht aus hellblau gefärbten, flimmernden und sekretorischen Zellen. Im Gegensatz dazu erscheinen die bösartigen Zellen im Epithel als Zellcluster mit dunklen Zellkernen.
Laden Sie das Probenfläschchen vor dem Färben der Zellen in einen automatisierten Prozessor für die Objektträgervorbereitung. Wenn die Objektträger fertig sind, tauchen Sie die Proben 10 Mal für 1 Sekunde pro Tauchgang in 95 % Ethanol, gefolgt von 10 Tauchgängen in Wasser, für 1 Sekunde pro Dip.
Tauchen Sie die Objektträger anschließend 10 bis 60 Sekunden lang in Hämatoxylin ein, gefolgt von einer zweiten Wasser-Ethanol-Wäsche. Tauchen Sie die Objektträger nach dem letzten Eintauchen in Ethanol für 1 bis 3 Minuten in Eosin Azurblau, gefolgt von einer weiteren Ethanolspülung mit Wasser. Tauchen Sie dann die Objektträger in Xylol; bis die Proben klar werden.
In diesem Artikel werden die morphologischen Merkmale des Eileiter-Epithels und deren Zusammenhang mit Eileiterkrebs erörtert. Es wird ein Färbeprotokoll beschrieben, um normale und maligne tubare Zellen unter dem Mikroskop sichtbar zu machen.
Die Papanicolaou-Färbung von Eileiter-Epithelzellen ermöglicht eine präzise Visualisierung zytologischer Merkmale, die für die Früherkennungsforschung bei Eierstock- und Eileiterkarzinomen entscheidend sind. Dieses Protokoll unterstützt die Identifizierung maligner gegenüber nicht-malignen Zellpopulationen und trägt somit zur Zielvalidierung und zur Risikominimierung hinsichtlich der Wirkmechanismen in onkologischen Entdeckungsprozessen bei. Eine zuverlässige zytologische Differenzierung erhöht die Vorhersagesicherheit an entscheidenden Wendepunkten translationaler Forschungsprojekte.
Dieses Färbeprotokoll integriert sich in den Übergang von der Entdeckung zur präklinischen Phase, indem es eine standardisierte Methode zur zytologischen Beurteilung von Tubuszellen bereitstellt.
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Zuletzt aktualisiert: 29 August 2026