JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Biologische Techniken
0 Aufrufe • 4:14 Min. • July 8th, 2025
Stressaktivierte kardiale Fibroblasten lagern überschüssiges Kollagen in verletzten Regionen ab, ein Zustand, der als Fibrose bezeichnet wird und die Herzfunktion beeinträchtigt.
Um das Ausmaß der Fibrose zu visualisieren, werden zunächst in Paraffin eingebettete Herzblöcke geschnitten. Platzieren Sie die Abschnitte auf einer Folie. Erhitzen Sie den Objektträger, um das Paraffin zu schmelzen, damit die Abschnitte haften können.
Tauchen Sie den Objektträger in Xylol, um das Gewebe zu entparaffinisieren. Behandeln Sie die Abschnitte mit absteigendem Alkoholgehalt, um die Abschnitte zu rehydrieren und die anschließende Bindung von wässrigen Fleckenkomponenten zu unterstützen.
Inkubieren Sie die Schnitte in einem sauren Fixiermittel, das Proteine vernetzt und die Gewebestruktur stabilisiert. Mit Wasser abspülen, um Reste des Fixiermittels zu entfernen.
Tauchen Sie den Objektträger in Hämatoxylinlösung. Der kationische Farbstoff bindet die negativ geladene DNA und färbt den Zellkern blau. Mit Wasser abspülen, um überschüssige Flecken zu entfernen.
Inkubieren Sie den Objektträger in saurem Fuchsin-Ponceau, einem niedermolekularen anionischen Farbstoff, der mit positiv geladenen zytoplasm
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