JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Biologische Techniken
0 Aufrufe • 2:49 Min. • July 8th, 2025
Bei der Fibrose handelt es sich um eine vermehrte Ablagerung von fibrillärem Kollagen in der extrazellulären Matrix des geschädigten Gewebes. Strukturell besteht es aus Drei-Helix-Kollagen-Polypeptidketten.
Um Kollagen mit Picrosiriusrot-Farbstoff zu färben, nehmen Sie einen Paraformaldehyd-fixierten, in Paraffin eingebetteten Herzgewebeschnitt. Tauchen Sie den Gewebeabschnitt in Xylol - ein organisches Lösungsmittel - um das umgebende Wachs aufzulösen.
Behandeln Sie das entparaffinisierte Gewebe nacheinander mit abnehmenden Alkoholkonzentrationen, um das Xylol zu ersetzen. Tauchen Sie das Gewebe in Wasser, um es für eine bessere Visualisierung der Flecken in den folgenden Schritten zu rehydrieren.
Tauchen Sie das Gewebe in eine Picrosirius-Rot-Lösung, die Sirius-Rot - einen anionischen Azofarbstoff - und Pikrinsäure enthält.
Sirius Red enthält saure sulfonische Gruppen, die mit den basischen Aminogruppen von Lysin, Hydroxylysin und Arginin interagieren, die im Kollagen vorhanden sind. Die Pikrinsäure trägt zur Aufrechterhaltung des sauren pH-Werts bei und erleichtert die Bindung von Farbstoffmolekülen in paralleler Ausrichtung mit dem Kollagen
.Spülen Sie die Objektträger in einer
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