Wiesner-Färbung zur Visualisierung von Lignin: Eine Technik zur Färbung von Ligninablagerungen in Stängeln von Arabidopsis thaliana

In Pflanzen lagert sich Lignin - ein komplexes Biopolymer - typischerweise in den Zellwänden des Gewebes ab, um Unterstützung zu bieten.

Die Verholzung findet sich vorwiegend in den sekundären Zellwandverdickungen von wasserleitenden Xylemzellen, wie Gefäßen und Fasern, und den extraxylären Zellen, wie z.B. interfaszikulären Fasern.

Strukturell setzt sich Lignin aus vernetzten Monolignol-Vorläufern zusammen. Diese aromatischen Alkohole polymerisieren und bilden eine stark verzweigte Struktur. Diese Eigenschaft erhöht die Festigkeit und Steifigkeit der Pflanze.

Um die Ligninabscheidung mittels Wiesner-Färbung sichtbar zu machen, nehmen Sie in Agarose eingebettete Dikotyledonenstängelquerschnitte, die aus dem mittleren oder unteren Teil der Pflanze stammen. Geben Sie sie in ein Mikrozentrifugenröhrchen, das einen geeigneten Puffer enthält.

Geben Sie die vorbereitete Fleckenlösung, die das angesäuerte Phloroglucinol und Ethanol enthält, in die Stängelabschnitte. Die im Lignin enthaltenen Alkohole reagieren mit dem Phloroglucinol und Ethanol zu einem rosa Pigment. Dies führt zur Entwicklung einer rosa Färbung, die der Ligninablagerung in den Zellwänden spezialisierter Zellen entspricht