Kongorot-Färbung: Eine Technik zur Visualisierung von Zelluloseablagerungen in Pflanzenstängelschnitten

0 Ansichten2:19 Min. • July 8th, 2025

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Cellulose ist ein unverzweigtes Polymer aus β-Glukose-Einheiten, die durch β-1→4-Bindung verbunden und über intermolekulare Wasserstoffbrückenbindungen parallel angeordnet sind.

Zellulose dient als Hauptstrukturkomponente der pflanzlichen Zellwand, verleiht den Zellen Form und Steifigkeit und erleichtert das Wachstum und die Entwicklung der Pflanze. Der Anteil an Zellulose innerhalb der Zellwand variiert in der gesamten Pflanze erheblich, je nach Zelltyp und Wachstumsstadium.

Um die Zelluloseablagerung im Stiel sichtbar zu machen, nehmen Sie dünne Querschnitte von in Agarose eingebetteten Stielabschnitten.

Fügen Sie Kongorot-Fluoreszenzfarbstoff hinzu und inkubieren Sie die Schnitte.

Kongorote Moleküle dringen in die Zellwand ein und bilden Wasserstoffbrückenbindungen mit den Hydroxylgruppen der Zellulose, wodurch sie an das Polymer adsorbiert werden. Dies verleiht der Epidermis, der Rinde und dem Mark eine rote Farbe.

Die Farbstoffmoleküle diffundieren auch in den komplexen Zellwänden des Xylems und der interfaszikulären Fasern, überwinden die starre Ligninbarriere und verleihen so auch diesen Geweben eine rote Farbe.

Spülen Sie nun die Abschnitte mit Wasser ab, um überschüssige Flecken zu entfernen. Übertragen Sie die Schnitte auf einen Objektträger und legen Sie ein Deckglas an.

Bei der Visualisierung unter einem Fluoreszenzmikroskop erscheinen die Epidermis, der Kortex, das zentrale Mark, das Xylem und die interfaszikulären Fasern rot, entsprechend ihrem Zellulosegehalt.

Für die Kongorot-Färbung übertragen Sie die Stielabschnitte in ein Mikrozentrifugenröhrchen und fügen Sie 1 Milliliter der 0,5%igen Kongorot-Lösung hinzu. Die 0,5%ige Kongorot-Lösung wird vorsichtig auf und ab pipettiert, ohne die Schnitte zu stören, bevor die Schnitte wie im Textprotokoll beschrieben inkubiert und gewaschen werden. Pipettieren Sie die Schnitte vorsichtig in eine abgeschnittene Pipettenspitze und auf einen Objektträger, dann bedecken Sie sie mit einem Deckglas. Betrachten Sie die Proben auf dem Objektträger unter Blaulichtanregung mit einem 560-Nanometer-Emissionsfilter.

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Zuletzt aktualisiert: 15 August 2026