Calcofluor-Weißfärbung: Eine einfache Methode zur UV-induzierten Fluoreszenzvisualisierung von Zelluloseablagerungen in Zellwänden von Dikotyledonen-Pflanzenstängelschnitten

In pflanzlichen Zellen umgibt die Zellwand, eine spezialisierte Schutzschicht, die Plasmamembran. Die Zellwand besteht überwiegend aus Cellulose, einem linearen, unverzweigten Polysaccharid von Glukosemonomeren, die über β-1, 4 glykosidische Bindungen Ende-zu-Ende verbunden sind.

Cellulose liegt in einem aggregierten Zustand in Form von orthogonal angeordneten Cellulose-Mikrofibrillen vor, die in eine Hemicellulose-, Pektin- und Proteinmatrix eingebettet sind.

Bestimmte Zellen, wie z. B. die des vaskulären Xylemgewebes und der interfaszikulären Fasern, enthalten in ihren Zellwänden auch das Härtungsmittel Lignin.

Um die Zelluloseablagerung in pflanzlichen Zellwänden sichtbar zu machen, beginnen Sie mit in Agarose eingebetteten Querschnitten eines Dikotyledonen-Pflanzenstamms in Puffer. Fügen Sie eine wässrige Lösung von Calcofluorweiß, einem chemifluoreszierenden, planaren Farbstoff, hinzu. Inkubieren, damit der Farbstoff in das Gewebe diffundieren kann.

Im Inneren interagiert Calcofluorweiß über seine Hydroxylfunktionellen Gruppen und bildet Wasserstoffbrückenbindungen mit Hydroxylgruppen von Glukosemonomeren in Zellulose. Dies bringt den Farbstoff in die Nähe von Zellulose und be