Calcofluor-Weißfärbung: Eine einfache Methode zur UV-induzierten Fluoreszenzvisualisierung von Zelluloseablagerungen in Zellwänden von Dikotyledonen-Pflanzenstängelschnitten

0 Ansichten2:37 Min. • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

In pflanzlichen Zellen umgibt die Zellwand, eine spezialisierte Schutzschicht, die Plasmamembran. Die Zellwand besteht überwiegend aus Cellulose, einem linearen, unverzweigten Polysaccharid von Glukosemonomeren, die über β-1, 4 glykosidische Bindungen Ende-zu-Ende verbunden sind.

Cellulose liegt in einem aggregierten Zustand in Form von orthogonal angeordneten Cellulose-Mikrofibrillen vor, die in eine Hemicellulose-, Pektin- und Proteinmatrix eingebettet sind.

Bestimmte Zellen, wie z. B. die des vaskulären Xylemgewebes und der interfaszikulären Fasern, enthalten in ihren Zellwänden auch das Härtungsmittel Lignin.

Um die Zelluloseablagerung in pflanzlichen Zellwänden sichtbar zu machen, beginnen Sie mit in Agarose eingebetteten Querschnitten eines Dikotyledonen-Pflanzenstamms in Puffer. Fügen Sie eine wässrige Lösung von Calcofluorweiß, einem chemifluoreszierenden, planaren Farbstoff, hinzu. Inkubieren, damit der Farbstoff in das Gewebe diffundieren kann.

Im Inneren interagiert Calcofluorweiß über seine Hydroxylfunktionellen Gruppen und bildet Wasserstoffbrückenbindungen mit Hydroxylgruppen von Glukosemonomeren in Zellulose. Dies bringt den Farbstoff in die Nähe von Zellulose und begünstigt zusätzliche Van-der-Waals-Wechselwirkungen, was zu einem stabilen Farbstoff-Zellulose-Komplex führt.

Übertragen Sie die Stielabschnitte auf einen Glasobjektträger und montieren Sie ein Deckglas. Unter Beleuchtung mit ultraviolettem Licht fluoreszieren die zellulosegebundenen Farbstoffmoleküle hellweiß.

Zellen der Epidermis, der Rinde und des Markits weisen aufgrund des hohen Zellulosegehalts eine intensive Fluoreszenz mit klar abgegrenzten Zellwandumrissen auf. Im Vergleich dazu fluoreszieren Zellen von Xylem- und interfaszikulären Fasern schwach, was möglicherweise auf eine unzureichende Farbstoffdiffusion aufgrund des Vorhandenseins von Lignin hindeutet.

Für die Färbung von Calcofluorweiß übertragen Sie die Stielabschnitte in ein Mikrozentrifugenröhrchen und fügen Sie einen Milliliter der 0,02%igen Calcofluorweißlösung hinzu. Pipettieren Sie die Lösung vorsichtig auf und ab. Fahren Sie mit der Inkubation fort und waschen Sie die Abschnitte wie im Textprotokoll beschrieben, bevor Sie die Abschnitte unter UV-Licht betrachten.

09:27

Hohe Auflösung Quantifizierung kristalliner Cellulose Akkumulation in Arabidopsis Roots Gewebespezifische Zellwand Änderungen überwachen

Ähnliche Videos

0 Aufrufe

07:44

Anwendung von Membran- und Zellwandselektiven Fluoreszenzfarbstoffen für die Live-Zell-Bildgebung von filamentösen Pilzen

Ähnliche Videos

0 Aufrufe

10:14

Fluoreszierende Immunlokalisierung von Arabinogalactan-Proteinen und Pektinen in der Zellwand von Pflanzengeweben

Ähnliche Videos

0 Aufrufe

02:19

Kongorot-Färbung: Eine Technik zur Visualisierung von Zelluloseablagerungen in Pflanzenstängelschnitten

Ähnliche Videos

0 Aufrufe

10:39

Histochemische Färbung von Arabidopsis thaliana Sekundärzellwand-Elemente

Ähnliche Videos

0 Aufrufe

08:05

Färbung des Cytoplasma Ca2+ mit Fluo-4/AM in Apfelzellstoff

Ähnliche Videos

0 Aufrufe

04:55

Optische Reinigung von Pflanzengeweben für die Fluoreszenzbildgebung

Ähnliche Videos

0 Aufrufe

11:48

Mikroskopische Techniken zur Interpretation der Pilzbesiedlung in mykoheterotrophen Pflanzengeweben und der symbiotischen Keimung von Samen

Ähnliche Videos

0 Aufrufe

07:21

Tiefenfluoreszenzbeobachtung in Reistrieben mittels Clearing-Technologie

Ähnliche Videos

0 Aufrufe

05:14

3D-Zeitraffer-Bildgebung der Zellwanddynamik mit Calcofluor im Moos Physcomitrium patens

Ähnliche Videos

0 Aufrufe

Zuletzt aktualisiert: 1 August 2026