Polyacrylamid-Gelelektrophorese: Eine analytische Technik zum Nachweis von Heparansulfaten unterschiedlicher Kettenlängen, die aus Lungengewebe von Mäusen isoliert wurden

Sulfatierte Glykosaminoglykane wie Heparansulfate, HSs, sind negativ geladene, lineare, sulfatierte Polysaccharide mit variabler Kettenlänge, die an Proteine der Zelloberfläche gebunden sind.

Um unterschiedlich lange HSs, die aus Lungengewebe von Mäusen isoliert wurden, abzuschätzen, beginnen Sie mit der Assemblierung der Gelkassette. Füllen Sie es teilweise mit hochkonzentrierter Acrylamid-Bisacrylamid-Lösung, einschließlich Katalysatoren - Ammoniumpersulfat und Tetramethyl-ethylen-diamin. Mit Wasser überziehen, um Luftkontakt zu verhindern, der die Polymerisation hemmen kann. Ausbrüten.

Katalysatoren induzieren die Acrylamid-Bisacrylamid-Polymerisation und bilden ein kleinporiges auflösendes Gel. Wasser wegwerfen. Geben Sie eine geringe Konzentration an Acrylamid-Bisacrylamid-Lösung mit Katalysatoren zu. Führen Sie einen Gelkamm ein, um Vertiefungen zu erzeugen. Die Lösung polymerisiert und bildet ein großporiges Stapelgel.

Beladen Sie die Kammern des Elektrophoresetanks mit Laufpuffer, um eine optimale elektrische Leitfähigkeit während der Elektrophorese zu gewährleisten.

Das HS-Gemisch wird in einem Ladepuffer gelöst, der Tracking-Farbstoff und Saccharose enthält. Übertragen Si