Mikrofluidische Kapillarelektrophorese zur Fragmentgrößenbestimmung von PCR-Produkten: Eine mikrochipbasierte elektrophoretische Trenntechnik zur Trennung von DNA-Fragmenten nach Größe

0 Aufrufe • 4:21 Min. • July 8th, 2025

Die mikrofluidische Elektrophorese ist eine Technik zur Trennung von DNA-Fragmenten unterschiedlicher Größe innerhalb von Mikrokapillaren.

Nehmen Sie zunächst einen mikrofluidischen Multi-Well-Chip mit ausgewiesenen Vertiefungen für die Mischung aus gelbasiertem Polymer und Fluoreszenzfarbstoff, DNA-Proben und einer bekannten DNA-Leiter mit bekanntem Molekulargewicht. Diese Vertiefungen sind über ein Netzwerk von Mikrokanälen miteinander verbunden.

Geben Sie die Gel-Farbstoff-Mischung in die zugewiesenen Vertiefungen. Montieren Sie den Chip auf einer Zündstation, die mit einer leeren Spritze vormontiert ist. Drücken Sie den Spritzenkolben nach unten und üben Sie Druck aus, um das Gel-Farbstoff-Gemisch in den Trennmikrokanal zu drücken.

Entfernen Sie den Chip und pipettieren Sie andere Komponenten in die entsprechenden Vertiefungen. Fügen Sie den Vertiefungen, die die Leiter und die Proben enthalten, einen Marker hinzu - einen internen Standard, der die Probengröße kalibriert.

Setzen Sie den Mikrochip in einen Fragmentanalysator ein, um den Chip auszuführen. Im Inneren erzeugt die angelegte Spannung elektrophoretische Kräfte, die die Probe aus der Vertiefung in den Mikrokanal für di

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