Messung der SMC-Kontraktion in vitro: Eine nicht-invasive Methode zur Bewertung der Kontraktion von glatten Muskelzellen mit Hilfe der elektrischen Zell-Substrat-Impedanzmessung

Die Aortenwand besteht überwiegend aus glatten Muskelzellen (SMCs), die kontraktile Proteinmaschinen enthalten, die sich zusammenziehen und entspannen, um den Blutfluss der Aorta zu regulieren.

Um die kontraktile Reaktion von Aorten-SMCs in vitro zu messen, besorgen Sie sich eine Multi-Well-Platte, die ein ECIS-Sensorarray (Electrical Cell-Substrate impedance sensing) enthält. Jedes Array enthält Goldfilmelektroden am Bohrlochboden, die mit einer Isolierfolie abgegrenzt sind. Die Vertiefungen mit Gelatine bestreichen.

Säen Sie die primäre menschliche SMC-Suspension in die Vertiefungen. Übertragen Sie die ECIS-haltige Well-Platte auf einen Plattenhalter, der mit einem Verstärker und einem Datenerfassungssystem verbunden ist, und stellen Sie dabei den Elektrodenkontakt mit dem Halter sicher. Legen Sie einen kleinen konstanten Wechselstrom zwischen den Elektroden an, um das Potential über ihnen zu messen.

Während der Inkubation haften SMCs an der Gelatinebeschichtung und verteilen sich. Die Zellen verhalten sich wie Isolatoren, die den Stromfluss zwischen den Elektroden begrenzen. Je mehr Zellen sich an der Oberfläche festsetzen, desto geringer ist der Stromfluss. Infolgedessen nehmen