JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Biologische Techniken
0 Aufrufe • 3:36 Min. • July 8th, 2025
Um die Wechselwirkung zwischen einem Phospholipid-bindenden Protein und einer Lipiddoppelschicht durch dissipative Mikrogravimetrie zu untersuchen, nehmen Sie eine Mikrowaage mit einem Quarzsensor. Beim Anlegen einer geeigneten Spannung schwingt die Quarzschicht, die zwischen zwei Metallelektroden eingebettet ist, mit einer bestimmten Frequenz.
Geben Sie eine Suspension aus kleinen unilamellären Vesikeln – bestehend aus einer einzigen Lipiddoppelschicht – auf den Sensor. Die Vesikel adsorbieren an der mit Siliziumdioxid beschichteten hydrophilen Oberfläche – wodurch die Sensormasse erhöht und die Schwingungsfrequenz proportional verringert wird.
Die mit Puffern gefüllten Vesikel wirken wie eine viskoelastische Schicht, die zur Dissipation führt – der Dämpfung der Schwingung. Die adsorbierten Vesikel platzen und geben den eingeschlossenen Puffer frei. Die daraus resultierende Abnahme der Masse erhöht die Schwingungsfrequenz.
Die geplatzten Vesikel bilden eine durchgehende Doppelschicht, die eine biologische Membran nachahmt. Die Steifigkeit der Doppelschicht verringert die Verlustleistung.
Fügen Sie einen Puffer mit Kalziumionen zusammen mit dem Zielprotein hinzu. Die Kalziumionen b
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