JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 4:17 Min. • July 8th, 2025
Mastzellen – weiße Blutkörperchen, die zytoplasmatische Granula enthalten, die mit Entzündungsmediatoren gefüllt sind – spielen eine wichtige Rolle bei der angeborenen und adaptiven Immunantwort.
Um Bindegewebs-Mastzellen aus der Bauchhöhle zu isolieren - einem mit Flüssigkeit gefüllten Raum, in dem Bauchorgane untergebracht sind - nehmen Sie eine euthanasierte Maus, die in Rückenlage fixiert ist. Machen Sie einen Längsschnitt bis zum Brustbein, wodurch die Bauchdecke freigelegt wird.
Die Bauchhöhle liegt unter der Bauchdecke und enthält Flüssigkeit, die mehrere Immunzellen beherbergt, darunter Makrophagen, Lymphozyten, polymorphkernige Leukozyten und Mastzellen.
Um die Zellen durch Peritonealspülung zu isolieren – das Ansaugen des intraperitonealen Inhalts – injizieren Sie ein eiskaltes Wachstumsmedium in die Bauchhöhle, ohne die Organe zu perforieren, um Blutleckagen zu vermeiden. Das kalte Medium trägt zur Aufrechterhaltung der Zelllebensfähigkeit bei.
Schütteln Sie die Maus vorsichtig für eine angemessene Dauer und mischen Sie die Immunzellen mit dem Medium. Führen Sie eine leere Spritze in den Hohlraum ein. Saugen Sie das Medium langsam ab und gewinnen Sie den größten Teil der
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