B-Zell-Aktivierung auf einem antigenbeschichteten Deckglas
JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 2:41 Min. • July 8th, 2025
Bei der B-Zell-Aktivierung werden Antigene von B-Zell-Rezeptoren, BCRs, auf ihrer Oberfläche erkannt, um eine Immunantwort auszulösen.
Um die B-Zell-Aktivierung in vitro zu untersuchen, beginnen Sie mit einem Deckglas mit Antigenen und Anti-CD45R-Antikörpern, das über einem Polymermaterial immobilisiert ist. Die negativ geladenen Antigene und Antikörper interagieren durch elektrostatische Wechselwirkungen mit positiv geladenen Polymeren auf dem Deckglas.
Die beschichteten Deckgläser mit einem B-Zell-haltigen Medium überlagern und inkubieren. Das CD45R – das Transmembranprotein der B-Zellen – interagiert mit den immobilisierten Antikörpern und erleichtert so die Zelladhäsion.
Die BCRs auf der adhärenten B-Zelle interagieren mit einem Antigen und bilden eine Immunsynapse – die Koordinationsregion für die Zellsignalisierung und die Antigeninternalisierung. Dies fördert den Umbau des Zytoskeletts und leitet die Zellausbreitung ein, wodurch die Zelloberfläche in Kontakt mit den Antigenen vergrößert wird.
Ein weiterer Umbau bewirkt die Bewegung von BCR-gekoppelten Antigenen in Richtung des Zentrums der Immunsynapse. Diese zelluläre Umlagerung bewirkt die Neupositionierung des Zentrosoms
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