Beurteilung der chemisch induzierten Kolitis durch immunhistochemische Analyse von Dickdarmgewebeschnitten

Bei Mäusen besteht die Dickdarmschleimhautschicht aus Immunzellen, die Lamina propria enthalten, umgeben von einem dicht gepackten Epithel, das die Schleimhaut schützt. Die chemische Behandlung mit Dextran-Natriumsulfat stört die Tight Junctions, was zu einer Schädigung der Epithelzellen führt und es luminalen Mikroben ermöglicht, in die Lamina propria einzudringen.

Die mikrobielle Erkennung im Dickdarm löst die Chemokinsekretion aus, was zur Infiltration von Immunzellen und zur Freisetzung von entzündungsfördernden Zytokinen führt. Diese übertriebene Immunantwort führt zu einer Dickdarmentzündung oder Kolitis.

Um die chemisch induzierte Kolitis zu beurteilen, beginnen Sie mit einem Objektträger mit einem festen, vorbehandelten Dickdarmgewebeschnitt der Maus, der eine chemisch induzierte Kolitis aufweist. Behandeln Sie den Abschnitt mit einem Cocktail aus primären Antikörpern, die spezifisch für die Rezeptoren der Immunzellen sind, die an ihre jeweiligen Immunzellen binden.

Waschen, um ungebundene Antikörper zu entfernen. Inkubieren Sie den Gewebeschnitt mit biotinylierten Sekundärantikörpern, die spezifisch an die Primärantikörper binden. Inkubieren Sie mit den Streptavidin-Enzym-