Infizieren von Fliegen mit Bakteriensuspension unter Verwendung eines Nanoinjektors

Um Fliegen zu infizieren, beginnen Sie mit einer Glasnadel mit schmalem Durchmesser, die mit Mineralöl gefüllt ist.

Befestigen Sie die Nadel mit einem O-Ring und einem Abstandshalter auf dem Nanoinjektorkolben, um eine präzise und kontrollierte Injektion zu gewährleisten und so eine minimale Beschädigung der Fliegen zu gewährleisten.

Geben Sie das Mineralöl ab und lassen Sie eine kleine Menge in der Nadel als Barriere zwischen der Bakterienlösung und dem Injektor. Laden Sie die Nadel mit der Bakteriensuspension.

Positionieren Sie einen anästhesierten Drosophila melanogaster mit der ventrolateralen Seite nach oben.

Injizieren Sie die Nadel in den vorderen Bauch der Fliege und durchstechen Sie die Kutikula und die Epithelschicht. Geben Sie die Bakteriensuspension in das Hämocoel – eine Körperhöhle, in der sich Hämolymphe befindet – eine nährstoffreiche Kreislaufflüssigkeit.

Innerhalb des Hämocoels zirkulieren Immunzellen, die Hämozyten, neben dem Fettkörper, einem spezialisierten Gewebe, das mit Mustererkennungsrezeptoren ausgestattet ist.

Lassen Sie die injizierten Fliegen sich in einer Durchstechflasche mit Medium erholen. Injizierte Bakterien nutzen die Nährstoffe aus der Hämolymp