Eine Technik zur Erzeugung von Influenzavirus-ähnlichen Partikeln über ein Säugetiersystem

Virusähnliche Partikel oder VLPs ahmen die Virusstruktur nach, aber es fehlt virales genetisches Material, wodurch sie nicht virulent sind. VLPs besitzen oberflächengebundene antigene Epitope, die von Immunzellen erkannt werden, was sie zu idealen Impfstoffkandidaten macht.

Um rekombinante Influenza-VLPs zu erzeugen, nehmen Sie eukaryotische Expressionsvektoren.

Zwei Vektoren enthalten Gene, die für Hämagglutinin (HA) und Neuraminidase (NA) kodieren - Strukturproteine des Influenzavirus. Der dritte Vektor enthält das Gag-Gen, das für die Kernproteine des humanen Immundefizienzvirus kodiert.

Fügen Sie ein Transfektionsreagenz auf kationischer Lipidbasis hinzu. Die positiv geladene Lipidkopfgruppe interagiert mit negativ geladener DNA und bildet eine Doppelschicht um die Vektoren – wodurch Liposomen-Transfektionskomplexe entstehen.

Komplexe auf kultivierte Säugetier-Wirtszellen aufbringen, die für die VLP-Produktion geeignet sind, und inkubieren. Transfektionskomplexe gelangen durch Endozytose in die Zellen – die Liposomenmembran verschmilzt mit der Endosomenmembran, um die Vektoren in das Zytoplasma freizusetzen.

Vektoren dringen in den Zellkern ein und führen zur Expression der vir