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Immunologie
0 Aufrufe • 3:29 Min. • July 8th, 2025
Um ein adjuvansinduziertes Arthritis-Mausmodell zu generieren, beginnen Sie mit einer anästhesierten Maus in Bauchlage.
Nehmen Sie eine Spritze mit vollständigem Freund-Adjuvans oder CFA, einer Suspension von hitzeabgetötetem Mycobacterium tuberculosis in Öl. Injizieren Sie das CFA in den Sprunggelenksspalt – eine mit Synovialflüssigkeit gefüllte Region zwischen dem Unterschenkelknochen und dem Fußknochen – gefolgt von einer Injektion in das das Gelenk umgebende Gewebe, das eine chronische Entzündung auslöst.
Der flüssigkeitsgefüllte Hohlraum wird von einer Synovialmembran begrenzt, die aus einer mit Makrophagen und Fibroblasten angereicherten Auskleidungsschicht besteht, die als immunologische Barriere fungiert, und einem interstitiellen Gewebe unter der Auskleidung.
Die Makrophagen erkennen das bakterielle Antigen und verwandeln sich in einen phagozytären Phänotyp, wodurch die Integrität der Barriere gestört wird. Die Makrophagen setzen auch Chemolockstoffe und Zytokine frei. Die freigesetzten Chemolockstoffe vermitteln die Rekrutierung von zirkulatorischen Neutrophilen an den Infektionsort.
Die Erkennung des bakteriellen Antigens aktiviert die Neutrophilen, was zu einer Degranulation führt. Freigesetzte Matrix-Metalloproteinasen und Proteasen verursachen Knorpelschäden und anhaltende Entzündungen.
Makrophagen-sezernierte Zytokine binden auch an Rezeptoren auf den synovialen Fibroblasten. Die Zytokinbindung und die Antigenerkennung induzieren die Aktivierung der Fibroblasten.
Aktivierte Fibroblasten durchlaufen eine abnormale Proliferation, die zu einer Synovialhyperplasie führt, die zu einer übermäßigen Produktion von Synovialflüssigkeit und Gelenkschwellungen führt, die für Arthritis charakteristisch sind.
Suspendieren Sie das vollständige Freund-Adjuvans, indem Sie mindestens fünf Sekunden lang vortexen. Ziehen Sie dann 100 Mikroliter Suspension in einen Insulininjektor.
Markieren Sie nach der Anästhesie die gewählte Pfote und injizieren Sie 20 Mikroliter des vollständigen Freund-Adjuvans aus dem Injektor in vier periartikuläre Flecken im Sprunggelenksspalt. Setzen Sie die verarbeiteten Mäuse in eine neue Kammer. Überwachen Sie die Mäuse, um sicherzustellen, dass sie atmen, bis sie wieder in der Lage sind, sich zu bewegen. Verwenden Sie alle drei Tage ein Taschendickenmessgerät, um den Durchmesser des Sprunggelenks zu messen.
Beurteilen Sie auch den Schweregrad der Arthritis anhand des Arthritis-Bewertungskriteriums. Null ist normal. Keine Anzeichen von Rötungen und Schwellungen.
Eine davon ist die mildeste Arthritis. Erythem und leichte Schwellung, die sich auf die Fußwurzeln oder das Sprunggelenk beschränken. Die zweite ist die mittelschwere Arthritis. Erythem und leichte Schwellung, die sich vom Knöchel bis zu den Fußwurzeln erstreckt. Drittens ist die schwere Arthritis. Erythem und mäßige Schwellung, die sich vom Knöchel bis zu den Mittelfußgelenken erstreckt. Vier ist die schwerste Arthritis. Erytheme und starke Schwellungen umfassen den Knöchel, den Fuß und die Zehen oder Ankylose der Extremität.