In vitro Stimulation und Visualisierung von extrazellulären Makrophagenfallen

Beginnen Sie mit einer adhärenten Makrophagenkultur.

Füge entzündungsfördernde Zytokine hinzu.

Das Zytokin bindet an die Oberflächenrezeptoren der Makrophagen und löst so eine Reihe von Entzündungsereignissen aus.

Erstens löst die Zytokin-Signalgebung die Produktion von antimikrobiellen Peptiden aus.

Gleichzeitig wird das Chromatin im Makrophagenkern dekondensiert.

Dieser Prozess, gepaart mit Veränderungen in der Membranzusammensetzung, zerstört die Kernmembran und setzt dekondensiertes Chromatin in das Zytoplasma frei.

Im Zytoplasma interagiert das antimikrobielle Peptid mit dem freigesetzten Chromatin.

Die durch Zytokinsignale vermittelte Permeabilisierung der Zellmembran bewirkt, dass das dekondensierte Chromatin in den extrazellulären Raum freigesetzt wird, wodurch eine Makrophage Extracellular Trap (MET) gebildet wird.

Diese netzartigen Strukturen bestehen aus DNA, Histonen, antimikrobiellen Molekülen und Enzymen.

Fügen Sie SYTOX Green hinzu, einen fluoreszierenden Nukleinsäurefarbstoff, der selektiv an die exponierte DNA in den extrazellulären Fallen bindet.

Unter einem Fluoreszenzmikroskop erscheint die MET als grüne Streifen extrazellulärer DNA, die von den stimulierten Mak