Eine Technik zur Beurteilung der in vivo Lokalisation von tumorspezifischen Antikörpern
JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Immunologie
0 Aufrufe • 4:13 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie eine Suspension von menschlichen Eierstockkrebszellen. Fügen Sie ein Basalmembran-Matrix-Medium hinzu und lassen Sie es auf Eis, um Gelbildung zu vermeiden.
Geben Sie die Mischung in eine Spritze und injizieren Sie sie subkutan in eine athyme Nacktmaus. Entfernen Sie die Nadel, sobald die Matrize geliert ist, um ein Ausstoßen der Mischung zu verhindern.
Das Fehlen einer Immunantwort bei der immundefizienten Maus erhält die Lebensfähigkeit der injizierten Zellen. Die extrazellulären Matrixproteine und Wachstumsfaktoren des Gels liefern wachstumsfördernde Signale und erleichtern die Tumorbildung.
Tumorzellen exprimieren den oberflächengebundenen Folatrezeptor alpha-1 oder FOLR1 überexprimiert.
Nehmen Sie FOLR1-spezifische Antikörper ein. Fügen Sie einen Fluoreszenzfarbstoff hinzu und inkubieren Sie, was eine Farbstoffkonjugation mit den Antikörpern ermöglicht.
Injizieren Sie die markierten Antikörper intravenös in die anästhesierte tumortragende Maus.
Antikörper gelangen über den Blutkreislauf in den Tumor und binden an FOLR1 auf Tumorzellen, wobei sie die Zelloberfläche fluoreszierend markieren.
Führen Sie In-vivo-Fluoreszenzbildgebung durch. Bei Anregung emittiert der Fa
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