Färbung von bakteriellen Zellen und Vorbereitung für immunologische Studien

Beginnen Sie mit einem Röhrchen mit einer Bakterienkultur in der exponentiellen Phase, um gleichmäßige und aktiv wachsende Bakterien für konsistente Ergebnisse zu gewährleisten.

Zentrifugieren Sie, um die Zellen zu sammeln, saugen Sie den trümmerhaltigen Überstand ab und resuspendieren Sie die Zellen.

Führen Sie einen zellpermeablen roten Fluoreszenzfarbstoff ein. Farbstoffmoleküle dringen in die bakterielle Zellmembran ein und erreichen das Nukleoid, binden sich an die DNA und verleihen den Bakterien rote Fluoreszenz.

Zentrifugieren Sie, um die gefärbten Bakterien zu pelletieren, und aspirieren Sie den ungebundenen farbstoffhaltigen Überstand.

Resuspendieren Sie die Bakterien in ein Wachstumsmedium, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu erhalten.

Messen Sie mit einem Photometer die Absorption der verdünnten Bakteriensuspension bei 600 Nanometern.

Vergleichen Sie den Absorptionswert mit einer Standardkurve, um die Bakterienkonzentration zu bestimmen.

Übertragen Sie das gewünschte Volumen der gefärbten Bakteriensuspension in ein frisches Röhrchen, das ein Wachstumsmedium enthält. Dadurch soll die gewünschte Bakterienkonzentration für die Wirtszellinfektion erreicht werden, die die Mu