Nachweis des Rhesusfaktors in menschlichen Blutproben mittels Magnetschwebetechnik

0 Ansichten4:10 Min. • July 8th, 2025

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Nehmen Sie eine paramagnetische Gadoliniumlösung, die auf äußere Magnetfelder reagiert.

Führen Sie fluoreszenzmarkierte Rhesus- oder Rhesusfaktor-positive und unmarkierte Rhesusfaktor-negative Blutproben ein.

Fügen Sie anti-RhD-Antikörper-beschichtete Polymerkügelchen mit niedriger Dichte und unbeschichtete Kügelchen mit hoher Dichte hinzu.

Anti-RhD-Antikörper binden an RhD-Antigene auf Rh-positiven Erythrozyten und bilden Bead-Erythrozyten-Komplexe.

Laden Sie nun die Probe in ein Kapillarröhrchen und verschließen Sie es. Platzieren Sie das Rohr zwischen Magneten in der Magnetschwebevorrichtung.

In dem Magnetfeld, das von gleichpoligen Magneten erzeugt wird, übt die paramagnetische Lösung magnetische Kräfte und Auftriebskräfte auf Probenkomponenten aus, wodurch sie in Höhen schweben, die proportional zu ihrer Dichte sind.

Kügelchen mit niedriger und hoher Dichte schweben am oberen bzw. unteren Rand der Kapillare und legen Dichtehöhenreferenzen fest.

Blutzellen, die diamagnetisch sind, werden durch ein starkes Magnetfeld in der Nähe der Magnete abgestoßen und schweben in einer Zwischenposition.

Die Bead-Erythrc-Komplexe schweben zwischen Kügelchen niedriger Dichte und Erythrozyten, wobei fluoreszierende Zellen in dieser Schicht das Vorhandensein von Rh-positiven Erythrozyten bestätigen.

Verwenden Sie zunächst die Ein-Klick-Lanzette, um den Finger des Rhesusfaktor-positiven Blutspenders zu pieksen und 10 Mikroliter Blut in 1 Milliliter DPBS zu sammeln. Fügen Sie 1 Mikroliter Fluoreszenzfarbstoff in einer 1-Milliliter-Suspension der Rhesusfaktor-positiven Zellen hinzu, um die Plasmamembran fluoreszierend zu färben, und inkubieren Sie 15 Minuten lang bei 37 Grad Celsius. Pelletieren Sie die Zellen, indem Sie sie 15 Sekunden lang mit 5.600 g drehen und das Pellet dreimal mit 1 Milliliter DPBS waschen. Resuspendieren Sie das Pellet in 1 Milliliter HBSS mit Calcium und Magnesium. Verwenden Sie die Ein-Klick-Stechhilfe, um den Finger des Rhesusfaktor-negativen Blutspenders zu stechen und zwei Mikroliter Blut zu sammeln.

Zur Herstellung des Versuchsröhrchens, das nur Kügelchen enthält, fügen Sie 174 Mikroliter HBSS mit Calcium und Magnesium, 1 Mikroliter IgG-Kontrollkügelchen, 1 Mikroliter schwere Kügelchen mit einer Dichte von 1,2 Gramm pro Milliliter und 24 Mikroliter 500 Millimolar Gadolinium hinzu.

Zur Herstellung des experimentellen Kontrollröhrchens, das IgG enthält, fügen Sie 172 Mikroliter HBSS mit Calcium und Magnesium, 1 Mikroliter IgG-Kontrollkügelchen, 1 Mikroliter schwere Kügelchen, 1 Mikroliter Rhesusfaktor-negatives Blut, 1 Mikroliter gefärbte Rhesusfaktor-positive Blutsuspension und 24 Mikroliter 500 millimolares Gadolinium hinzu.

Zur Vorbereitung des Probenexperimentierröhrchens fügen Sie 172 Mikroliter HBSS mit Calcium und Magnesium, 1 Mikroliter Anti-RhD-beschichtete Kügelchen, 1 Mikroliter schwere Kügelchen, 1 Mikroliter Rhesusfaktor-negatives Blut, 1 Mikroliter gefärbte Rhesusfaktor-positive Blutsuspension und 24 Mikroliter 500 Millimolar Gadolinium hinzu. Stellen Sie das Magnetschwebegerät auf und laden Sie 50 Mikroliter der Probe in ein Kapillarröhrchen, bis das Röhrchen gefüllt ist.

Verschließen Sie die Enden des Kapillarrohrs mit einem Kapillardichtmittel und achten Sie darauf, dass keine Blasen entstehen. Platzieren Sie das Kapillarrohr in der Kapillarhalterung zwischen dem oberen und unteren Magneten. Passen Sie den Tisch und den Fokus für eine optimale Anzeige an. Warten Sie etwa 5 bis 20 Minuten, bis sich die Zellen und Kügelchen in ihrer magnetischen Gleichgewichtsposition abgesetzt haben.

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Zuletzt aktualisiert: 1 August 2026