Quantifizierung der Immunmediator-Spiegel in der menschlichen Schleimhautschleimhaut
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Immunologie
0 Aufrufe • 2:55 Min. • July 8th, 2025
Tauen Sie die Filterpapiere mit der absorbierten Nasenschleimhautschleimhautflüssigkeit auf Eis auf, um eine Verschlechterung der Probe zu verhindern.
Die Flüssigkeit enthält Immunmediatoren, darunter Chemokine und Zytokine.
Tauchen Sie die Filterpapiere in einen Puffer. Den Inhalt in Röhrenfilter umfüllen. Zentrifugen, um die Schleimhautauskleidungsflüssigkeit aus dem Filterpapier zu eluieren.
Geben Sie den gefilterten Nasenextrakt in die Assay-Platte, die mit einem Array von mediatorspezifischen Capture-Antikörpern strukturiert ist.
Die Immunmediatoren binden an die entsprechenden Antikörper.
Einführung von Nachweisantikörpern, die mit einem Ruthenium-Komplex markiert sind und an ihre jeweiligen Mediatoren binden.
Fügen Sie Tris-basierten Puffer hinzu, der Tripropylamin oder TPA enthält.
Wenn ein Potential an die Elektroden angelegt wird, oxidieren der Ruthenium-Komplex und TPA.
Das entstehende TPA-Radikal regt den Ruthenium-Komplex an.
Bei der Rückkehr in seinen Grundzustand emittiert der Ruthenium-Komplex Photonen.
Die gemessene Lichtintensität ist proportional zur spezifischen Immunmediatorenkonzentration in der Schleimhautflüssigkeit.
Für die Quantifizierung von Immunmediator
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