Eine immunhistochemische Färbung zum Nachweis von Tollwutvirus-Antigenen

Beginnen Sie mit einem Objektträger, der einen mit Formalin fixierten, in Paraffin eingebetteten, mit Tollwutviren infizierten Schnitt aus dem Gehirngewebe der Maus enthält. Der fixierte Abschnitt hält virale Antigene durch Proteinvernetzung zurück.

Behandeln Sie den Objektträger mit einer Xylollösung, um das Paraffin zu entfernen.

Tauchen Sie den Objektträger in abnehmende Ethanolkonzentrationen, um das Gewebe zu rehydrieren und es mit wässrigen Lösungen kompatibel zu machen.

Einführung eines Protease-haltigen Puffers, um Proteinvernetzungen zu unterbrechen und die Zugänglichkeit des Antigens zu verbessern.

Tauchen Sie Wasserstoffperoxid ein, um endogene Peroxidasen zu blockieren, und tragen Sie eine Blockierungslösung auf, um unspezifische Wechselwirkungen zu verhindern.

Einführung von Primärantikörpern, die spezifisch für das Tollwutantigen sind und Antigen-Antikörper-Komplexe bilden.

Fügen Sie biotinylierte Sekundärantikörper hinzu, die an die Primärantikörper binden. Inkubieren Sie mit Streptavidin-konjugierten Peroxidase-Enzymen, die mit Biotin interagieren.

Führen Sie ein Peroxidasesubstrat ein, wodurch ein magentaroter Niederschlag entsteht.

Färben Sie das Gewebe mit einer