Bestimmung der Rolle neutrophilenähnlicher Zellen bei der Empfindlichkeit von Lymphomzellen gegenüber einem Testmedikament

Nehmen Sie eine Multi-Well-Platte mit 3D-Sphäroid-Monokulturen von Lymphomzellen, krebsartigen weißen Blutkörperchen und Co-Kulturen von Lymphomen und neutrophilenähnlichen Zellen in einer Basalmembranmatrix.

Fügen Sie ein Testmedikament hinzu, das an intrazelluläres Tubulin bindet und die Mikrotubuli-Polymerisation stört, was zu einer zellulären Apoptose führt.

In der Co-Kultur werden durch direkten Kontakt mit Lymphomzellen die neutrophilenähnlichen Zellen aktiviert und die Zytokinsekretion induziert.

Diese Zytokine interagieren mit den Rezeptoren der Lymphomzellen, lösen nachgeschaltete Signalkaskaden aus und regulieren die Expression anti-apoptotischer Proteine hoch, wodurch das Überleben der Zellen gefördert wird.

Entsorgen Sie die Medien. Fügen Sie einen Dissoziationspuffer hinzu, um die Zelladhäsion zu unterbrechen.

Kratzen Sie die Sphäroide ab und brüten Sie sie unter Rührung aus. Die Suspension wird in Röhrchen überführt und weiter gerührt, um einzellige Suspensionen zu bilden.

Einführung eines Fluorophor-konjugierten Antikörpercocktails, der Lymphome und neutrophile Zellen markiert.

Fügen Sie Fluorophor-markiertes Annexin V und Propidiumiodid hinzu, um apoptotische und to