Nachweis von humanen Insel-Autoantikörpern mittels eines Elektrochemilumineszenz-Assays
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Immunologie
0 Aufrufe • 6:09 Min. • July 8th, 2025
Um Insel-Autoantikörper – einen Biomarker für Typ-1-Diabetes – nachzuweisen, nehmen Sie menschliche Serumproben und fügen Sie Essigsäure hinzu, um störende Komponenten zu hemmen.
Inkubieren und dann einen alkalischen Puffer hinzufügen, um die Säure zu neutralisieren.
Das behandelte Serum wird auf eine Multiwell-Platte übertragen, die eine Mischung aus Autoantigenen für menschliche Inseln, einschließlich biotinylierter Fänger- und Ruthenium-konjugierter Antigene, jeweils in einer optimalen Konzentration für den Assay enthält.
Der Inselautoantikörper in der positiven Probe verbindet das Ruthenium-konjugierte Antigen mit dem biotinylierten Capture-Antigen und bildet einen Antigen-Antikörper-Komplex.
Übertragen Sie das Gemisch in eine mit Streptavidin beschichtete Elektrochemilumineszenzplatte, die mit einem Blockierungsmittel vorbehandelt und mit Arbeits- und Gegenelektroden ausgestattet ist.
Inkubieren, um biotinylierte komplexe Wechselwirkungen mit dem gebundenen Streptavidin zu ermöglichen, und dann waschen.
Fügen Sie einen Puffer hinzu, der Tripropylamin oder TPA enthält.
In einem Elektrochemilumineszenz-Instrument wird durch die angelegte Spannung zwischen den Elektroden die Oxid
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