Verbesserung der viralen Transduktion in natürlichen Killerzellen mit Hilfe eines kationischen Polymers

Nehmen Sie natürliche Killerzellen oder NK-Zellen. Fügen Sie Lentivirus-Vektoren hinzu, die aus viralen Enzymen und manipulierten RNA-Molekülen bestehen, die für ein fluoreszierendes Protein kodieren.

Fügen Sie kationische Polymere hinzu und sedimentieren Sie die Zellen und Viren.

Die Polymere neutralisieren die negativen Ladungen sowohl auf dem Virus als auch auf der Zelle und erleichtern so die Membranfusion.

Die RNA wird in DNA revertiert und in das Wirtsgenom integriert, wodurch die Expression fluoreszierender Proteine ermöglicht wird.

Fügen Sie Medien hinzu, die mit dem Zytokin Interleukin-2 oder IL-2 ergänzt sind.

IL-2 löst eine intrazelluläre Signalübertragung aus, die das Überleben und die Proliferation von NK-Zellen fördert und gleichzeitig die Transgenexpression beibehält.

Übertragen Sie die Mischung auf eine gut beschichtete Beschichtung, die mit Antikörpern beschichtet ist, die an spezifische Immunrezeptoren auf NK-Zellen binden und diese dazu veranlassen, antivirale Zytokine freizusetzen.

Quantifizieren Sie die freigesetzten Zytokine, um den Einfluss des Polymers auf die Zytokinproduktion zu bewerten.

Fügen Sie Fluoreszenzfarbstoffe hinzu, um die DNA nekrotischer Zelle