Name: Geändert Technik für Coronary Artery Ligation in Mäuse (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-03-29T12:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 47 s
Description: Lernen Sie die modifizierte Technik zur Ligatur der linken vorderen absteigenden Koronararterie bei Mäusen für kardiovaskuläre Forschung. Diese Methode ermöglicht die zuverlässige Induktion von Myokardinfarkten zur Untersuchung von Herzfunktion und Erholungsmechanismen.

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Ein. Protokoll Text <ol><li> Bevor eine Operation, zu betäuben eine männliche Maus (C57BL / 6), 6 Wochen alt oder älter durch Einatmen von 2-5% Isofluran ist. Führen Sie einen Zeh Prise zu bestätigen, dass das Tier ausreichend betäubt ist. </li><li> Die unbewußte Maus auf seiner Rückseite an einem warmen Pad gelegt, um eine konstante Temperatur von 37 ° C zu halten Der präkordiale Brust auf der linken Seite ist rasiert. </li><li> Sichern Sie die Maus auf einer Intubation Gerät mit einem Isofluran gefüllte Kammer. Ein Rohr von 0,2 Innendurchmesser in die Maus die Luftröhre durch Mund, dann den intubierten Maus auf einer aseptischen chirurgischen Bereich (37 ° C mittels eines Temperaturreglers) anschließen und den Endotrachealtubus mit einem Beatmungsgerät (Rate von 120 pro Minute, Druck von 4-6 mm H 2 O); desinfizieren den Bereich mit betadine und 75% Ethanol. </li><li> Bewerben Augensalbe, um die Maus in die Augen. Zeigen Standard-EKG-Elektroden an den Pfoten und schließen Sie die Maus an den EKG-Schreiber. </li&gt; <li> Verwenden einer sterilen Schere, eine 1,5 cm lange Inzision entlang der mittleren Axillarlinie machen. Scheren sind anstatt einem Skalpell verwendet, um eine Verletzung des darunterliegenden Gewebes in Mäusen verhindern. Dann verwenden Sie stumpfe Spitze Gefäß Schere zu sezieren und Einfahren der präkordialen Muskel von der Brustwand. </li><li> Führe eine linksseitige Thorakotomie zwischen dem dritten und vierten Rippen, um die vordere Oberfläche des Herzens und linken Lunge visualisieren </li><li> Weitere einfahren Brustwand mit einem geeigneten Haken, um Visualisierung und Zugänglichkeit zu verbessern. Entfernen Sie den Herzbeutel mit gezahnten Pinzette und stumpfen Schere. </li><li> Ligieren die linke Koronararterie, indem die Nadel (gebunden mit 7-0 Ethilon Nahtmaterial) unterhalb der Arterie mit einem Band von Myokard zwischen der Kapsel und der Arterie. Eine erfolgreiche Okklusion der Koronararterie wird durch Bewegungsmangel / Akinese der vorderen Wand des linken Ventrikels und durch die Veränderungen der EKG-Aufzeichnung (verified zB ST-Strecken-Hebung, QRS broadening) </li><li> Schließen der Brust, indem zwei Maschen (6-0 Ethilon Naht) auf der dritten und vierten Rippe. </li><li> Verwenden Sie 5-0 Ethilon Naht an der Haut zu schließen. </li><li> Für die postoperative Analgesie, verwalten eine einzelne intraperitoneale Injektion von Buprenorphin (0,05 mg / kg). Die Tiere werden spontan innerhalb von 2-5 min zu erholen nach dem Anhalten Isofluran-Narkose. Schließlich legen Sie die Maus in eine warme Käfig und geben 0,6 mg / ml von Buprenorphin im Trinkwasser (Text-Overlay: 0,6 mg / ml in Trinkwasser) bis zur postoperativen Stress zu vermeiden. Überwacht die Maus für den ersten 24 Stunden nach der Operation. </li><li> Echokardiographie durchgeführt wird, um die Herzfunktion von 3 Tagen nach Myokardinfarkt zu bewerten. Erfolgreiche Verfahren wird durch Akinese in der vorderen Wand des linken Ventrikels (siehe beiliegende Video Ergebnisse) verifiziert. Am Ende des Versuchs wird das Herz gesammelt und gelagert werden-80oC für weitere Untersuchungen. Dh Genexpression. </li></ol>

<ol><li>Tabrizchi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beta-blocker+therapy+after+acute+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Rev.+Cardiovasc.+Ther%22%5BJournal%5D)">Beta-blocker therapy after acute myocardial infarction.</a> Expert Rev. Cardiovasc. Ther. 11, 293-296 (2013).</li>
<li>Pell, S., Fayerweather, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trends+in+the+incidence+of+myocardial+infarction+and+in+associated+mortality+and+morbidity+in+a+large+employed+population%2C+1957-1983%5BTitle%5D)+AND+%22N.+Engl.+J.+Med%22%5BJournal%5D)">Trends in the incidence of myocardial infarction and in associated mortality and morbidity in a large employed population, 1957-1983.</a> N. Engl. J. Med. 312, 1005-1011 (1985).</li>
<li>Ramunddal, T., Gizurarson, S., Lorentzon, M., Omerovic, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antiarrhythmic+effects+of+growth+hormone--in+vivo+evidence+from+small-animal+models+of+acute+myocardial+infarction+and+invasive+electrophysiology%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Electrocardiol%22%5BJournal%5D)">Antiarrhythmic effects of growth hormone--in vivo evidence from small-animal models of acute myocardial infarction and invasive electrophysiology.</a> J. Electrocardiol. 41, 144-151 (2008).</li>
<li>Thom, T., Haase, N., Rosamond, W., Howard, V. J., Rumsfeld, J., Manolio, T., Zheng, Z. J., Flegal, K., O'Donnell, C., Kittner, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+disease+and+stroke+statistics--2006+update%3A+A+report+from+the+american+heart+association+statistics+committee+and+stroke+statistics+subcommittee%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart disease and stroke statistics--2006 update: A report from the american heart association statistics committee and stroke statistics subcommittee.</a> Circulation. 113, 85-151 (2006).</li>
<li>van den Bos, E. J., Mees, B. M., de Waard, M. C., de Crom, R., Duncker, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+model+of+cryoinjury-induced+myocardial+infarction+in+the+mouse%3A+A+comparison+with+coronary+artery+ligation%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">A novel model of cryoinjury-induced myocardial infarction in the mouse: A comparison with coronary artery ligation.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 289, 1291-1300 (2005).</li>
<li>Omerovic, E., Ramunddal, T., Lorentzon, M., Nordlander, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+neuropeptide+y2+receptor+blockade+on+ventricular+arrhythmias+in+rats+with+acute+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Effects of neuropeptide y2 receptor blockade on ventricular arrhythmias in rats with acute myocardial infarction.</a> Eur. J. Pharmacol. 565, 138-143 (2007).</li>
<li>Ahn, D., Cheng, L., Moon, C., Spurgeon, H., Lakatta, E. G., Talan, M. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+myocardial+infarcts+of+a+predictable+size+and+location+by+branch+pattern+probability-assisted+coronary+ligation+in+c57bl%2F6+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Induction of myocardial infarcts of a predictable size and location by branch pattern probability-assisted coronary ligation in c57bl/6 mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 286, 1201-1207 (2004).</li>
<li>Lindbom, M., Ramunddal, T., Camejo, G., Waagstein, F., Omerovic, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+effects+of+myocardial+creatine+depletion+on+left+ventricular+function+morphology+and+lipid+metabolism%3A+Study+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Card+Fail%22%5BJournal%5D)">In vivo effects of myocardial creatine depletion on left ventricular function morphology and lipid metabolism: Study in a mouse model.</a> J. Card Fail. 14, 161-166 (2008).</li>
<li>Omerovic, E., Bollano, E., Basetti, M., Kujacic, V., Waagstein, L., Hjalmarson, A., Waagstein, F., Soussi, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioenergetic%2C+functional+and+morphological+consequences+of+postinfarct+cardiac+remodeling+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Mol.+Cell.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Bioenergetic, functional and morphological consequences of postinfarct cardiac remodeling in the rat.</a> J. Mol. Cell. Cardiol. 31, 1685-1695 (1999).</li>
<li>Gao, E., Lei, Y. H., Shang, X., Huang, Z. M., Zuo, L., Boucher, M., Fan, Q., Chuprun, J. K., Ma, X. L., Koch, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+and+efficient+model+of+coronary+artery+ligation+and+myocardial+infarction+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Circ.+Res%22%5BJournal%5D)">A novel and efficient model of coronary artery ligation and myocardial infarction in the mouse.</a> Circ. Res. 107, 1445-1453 (2010).</li>
</ol>

Keine Interessenskonflikte erklärt.

Das chirurgische Verfahren für LCA Ligation wie in diesem Bericht gezeigt, ist eine zuverlässige und reproduzierbare Methode zur Induktion der experimentellen MI bei Mäusen 3, 6. Die Ligation von LCA entsprechend diesem Protokoll induziert Myokardischämie Eingriff typischerweise ~ 40% des linken Ventrikels 3. Dies induziert signifikante EKG-Veränderungen im ST-Segment 7 und sichtbaren Blässe auf der vorderen Oberfläche des Herzens. Aufgrund der großen Myokardinfarkt, können die Mortalitä...

geändert technik für coronary artery ligation in mäuse

Modified Technique for Coronary Artery Ligation in Mice

Myokardinfarkt (MI) ist eine der wichtigsten Ursachen für Mortalität beim Menschen 1-3. Um die Morbidität und Mortalität bei Patienten mit MI brauchen wir bessere Kenntnisse über Pathophysiologie der Myokardischämie zu verbessern. Dieses Wissen kann wertvoll sein, um neue therapeutische Targets für innovative kardiovaskulären Therapien 4 definieren. Experimentelle MI-Modell bei Mäusen ist eine zunehmend beliebte kleine Tiermodell in der präklinischen Forschung, in der MI durch permanente oder temporäre Unterbindung der linken Koronararterie (LCA) 5 induziert wird. In diesem Video beschreiben wir die Schritt-für-Schritt-Methode, wie experimentelle MI in Mäusen zu induzieren. Das Tier ist erste betäubt mit 2% Isofluran. Die Maus wird dann unbewussten intubiert und mit einem Ventilator zur künstlichen Beatmung. Die linke Brust ist rasiert und 1,5 cm Schnitt entlang mittleren Axillarlinie in der Haut. Die linke großen Brustmuskel ist unverblümt dissociated bis die Rippen freigelegt sind. Die Muskelschichten werden beiseite und zog dann mit einer Augenlid-Retraktor. Nach diesen Vorbereitungen wird linksseitige Thorakotomie zwischen dem dritten und vierten Rippen ausgeführt, um die vordere Oberfläche des Herzens und linken Lunge visualisieren. Das proximale Segment des LCA Arterie wird dann mit einem 7:0 Ethilon Nahtmaterial die typischerweise induziert eine Infarktgröße ~ 40% des linken Ventrikels ligiert. Am Ende wird die Brust geschlossen und die Tiere bekommen postoperative Analgesie (Temgesic, 0,3 mg/50 ml, ip). Die Tiere sind in einem warmen Käfig, bis Spontanheilung gehalten.

<table border="1"><tbody><tr><td> Instrument </td><td> Funktionsbeschreibung </td></tr><tr><td> Blunt-Spitze Schere </td><td> Verwendet, um Haut, Interkostalraum Brustmuskel und Nähte geschnitten </td></tr><tr><td> Eye Retraktor </td><td> Verwendet werden, um chirurgische Exposé </td></tr><tr><td> Blunt-Spitze Pinzette </td><td> Verwendet, um Haut und Muskeln zu begreifen </td></tr><tr><td> Nadelhalter </td><td> Um eine Nadel zu halten </td></tr><tr><td> 5-0 Nahtmaterial </td><td> Verwendet, um Haut nähen </td>...

Das chirurgische Verfahren zum experimentellen Herzinfarkt in Mäusen zu induzieren beginnt mit linken Thorakotomie zwischen der dritten und der vierten Rippe, um die vordere Oberfläche des Herzens und linken Lunge visualisieren. Die linke Koronararterie ligiert ist, wird die Brust geschlossen und der Maus erlaubt ist, spontan zu erholen.

Geändert Technik für Coronary Artery Ligation in Mäuse

Der Myokardinfarkt (MI) ist eine der bedeutendsten Todesursachen beim Menschen1-3. Um die Morbidität und Mortalität von Patienten mit einem MI zu verbessern ...

Das allgemeine Ziel dieses Verfahrens besteht darin, bei Mäusen einen Myokardinfarkt zu erzeugen. Dies wird erreicht, indem zunächst ein Hautschnitt entlang der mittleren Achselarterie vorgenommen wird. Anschließend erfolgt durch eine linke Thorakotomie zwischen der dritten und vierten Rippe die Exposition des Herzens.Anschließend erfolgt eine Ligatur am proximalen Abschnitt der Arteria descendens anterior sinistra. Schließlich wird der Brustkorb verschlossen und die Maus in einen Käfig zur spontanen Erholung zurückgebracht. Letztendlich kann der Myokardinfarkt mittels Elektrokardiographie oder Echokardiographie untersucht werden.Die visuelle Demonstration dieser Methode ist entscheidend, da das Ligieren der Koronararterie in der Nähe des linken Ventrikels schwer zu erlernen ist. Eine ausreichende myokardiale Ischämie wird sichergestellt, indem die Ligatur direkt unterhalb des Abgangs der linken Koronararterie angelegt wird. Allerdings ist darauf zu achten, den linken Ventrikel nicht zu perforieren, da dies zu einem tödlichen Blutungsereignis führen kann.Um die Operation zu beginnen, anästhesieren Sie eine Maus, die sechs Wochen oder älter ist, mittels Inhalation mit zwei bis 5 % F

modified-technique-for-coronary-artery-ligation-in-mice

Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Zahlreiche genetische Manipulationen und / oder intramyokardialen Injektionen von Genen, Proteinen, Zellen und / oder Biomaterialien basieren auf die Dimension der Zeit in Studien zur akuten Ischämie / Reperfusion und chronischer Umbau in Mäusen überlagert. Dieses Video zeigt die mikrochirurgische Verfahren für die Ischämie / Reperfusion, permanent koronare Ligation und intramyokardialen Injektion Studien.

Koronare Ligation und intramyokardialen Injection in einem Mausmodell der Infarkt

In diesem Video beschreiben wir einen chirurgischen Eingriff, um ein Mausmodell für einen Myokardinfarkt zu erstellen, indem die linke anteriore absteigende Koronararterie dauerhaft ligiert wird.

Generierung eines Mausmodells des Myokardinfarkts: Ein chirurgisches Verfahren zur dauerhaften Ligatur der linken vorderen absteigenden Koronararterie im Mausmodell

Wir stellen ein chirurgisches Verfahren, experimentelle Ischämie / Reperfusions (I / R) Schädigung induzieren Myokardinfarkt (MI) in Mausmodellen, die für mehr Klarheit in der Positionierung der Ligation an der linken vorderen absteigenden Arterie (LAD) simulieren können, um die Reproduzierbarkeit zu erhöhen MI Experimente in Mäusen.

Einem Mausmodell der myokardialen Ischämie-Reperfusion Injury durch Ligation des linken vorderen absteigenden Arterie

Ein hochgradig reproduzierbares Modell für Myokardinfarkt bei Mäusen mit minimalinvasiven Manipulationen wird beschrieben. Das Modell kann einfach durchgeführt werden, was zu einer hohen Reproduzierbarkeit und Überlebensrate führt. Somit wird das beschriebene Modell die Anzahl der benötigten Tiere reduzieren, wie es das 3R-Prinzip (Replacement, Refinement and Reduction) verlangt.

Minimal-invasive chirurgische Verfahren zur Induktion Myokardinfarkt in Mice

Herzinsuffizienz ist die Hauptursache für Krankenhausaufenthalte und eine der Haupttodesursachen. Ein Modell der permanenten Ligatur der linken anterioren absteigenden Koronararterie bei Mäusen wird angewendet, um den ventrikulären Umbau und die kardiale Dysfunktion nach einem Myokardinfarkt zu untersuchen. Die Technik der invasiven hämodynamischen Messungen an Mäusen wird vorgestellt.

Permanent Ligation des linken vorderen absteigenden Koronararterie bei Mäusen: Ein Modell der Post-Myokardinfarkt Umbau und Herzinsuffizienz

Wir bieten eine zuverlässige Methode für die Ligatur der linken vorderen absteigenden Arterie (LAD) in einem Mausmodell an. Diese Methode ist vergleichsweise weniger invasiv als andere Methoden, die eine endotracheale Intubation, einen linksseitigen Thorakotomieansatz und eine Thorakozentese umfassen. Diese Methode kann sowohl als Modell für akuten als auch für chronischen Myokardinfarkt (MI) verwendet werden.

Murine linken vorderen absteigenden (LAD) Koronararterienligatur: ein verbessertes und vereinfachtes Modell für Myokardinfarkts

Hierin beschreiben wir ein chirurgisches Verfahren, das zeigt, wie eine dauerhafte Ligation der links-vorderen absteigenden Herzkranzgefäße bei Mäusen erreicht werden kann. Dieses Modell ist von hoher Relevanz für die Untersuchung der Pathophysiologie des Myokardinfarkts und der damit einhergehenden biologischen Prozesse.

Murine Myokardinfarkt Modell mit permanenten Ligation der linken Anterior absteigende Koronararterie

Unter angemessener Anästhesie wurde das Mäuseherz durch den Interkostalraum externalisiert, und der Myokardinfarkt wurde erfolgreich durch Ligatur der linken vorderen absteigenden Arterie (LAD) unter Verwendung von Materialien induziert, die in den meisten Labors leicht verfügbar sind.

Eine modifizierte einfache Methode zur Induktion von Myokardinfarkt bei Mäusen

Hier beschreiben wir eine einfache und reproduzierbare Methode, die bei Mäusen durch Präzisionsligation der linken vorderen absteigenden Koronararterie durch Mikromanipulation einen Myokardinfarkt oder eine myokardiale Ischämie-Reperfusionsverletzung induzieren kann.

Induktion von Myokardinfarkt und myokardialer Ischämie-Reperfusionsschädigung bei Mäusen

Hier wird ein chirurgisches Verfahren zur permanenten Ligatur der linken Koronararterie bei Mäusen vorgestellt. Mit diesem Modell kann die Pathophysiologie und die damit verbundene Entzündungsreaktion nach Myokardinfarkt untersucht werden.

Linke Koronararterienligatur: Ein chirurgisches Mausmodell des Myokardinfarkts

Lernen Sie die modifizierte Technik zur Ligatur der linken vorderen absteigenden Koronararterie bei Mäusen für kardiovaskuläre Forschung. Diese Methode ermöglicht die zuverlässige Induktion von Myokardinfarkten zur Untersuchung von Herzfunktion und Erholungsmechanismen.

Geändert Technik für Coronary Artery Ligation in Mäuse

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