Orale Verabreichung von transformierten Hefezellen in das intestinale Immunsystem der Maus

Beginnen Sie mit einem Röhrchen zum Einnehmen, das eine Suspension von genetisch transformierten, auxotrophen Hefen enthält, die nicht in der Lage sind, Uracil-Nukleobase zu produzieren.

Führen Sie den oralen Schlauch in den Mund einer gefesselten Maus ein und führen Sie ihn zum Magen.

Verabreichen Sie die Hefesuspension direkt in den Magen, so dass sie schließlich den Dünndarm erreichen kann.

Der Dünndarm enthält Epithelzellen, darunter befinden sich Peyer-Flecken, die reich an Immunzellen sind.

Mikrogefaltete Zellen, spezialisierte Darmepithelzellen in der Nähe der Peyer-Pflaster, verschlingen die Hefezellen und verinnerlichen sie in Vesikel.

Diese Vesikel bewegen sich durch die Zellen und geben Hefezellen in das darunter liegende Peyer-Pflaster ab.

Isolieren Sie das Peyer-Pflaster aus dem getöteten Mausdarm und erhalten Sie eine gleichmäßige Zellsuspension.

Kulturieren Sie diese Zellsuspension auf einem hefeselektiven Medium, das Uracil enthält.

Auxotrophe Hefe nutzt das Uracil und vermehrt sich, um Kolonien zu bilden, was die Abgabe von transformierten Hefezellen in das intestinale Immunsystem der Maus bestätigt.

Nach der Vorbereitung der Hefekulturen gemäß dem Textprotokoll wi