Erzeugung von Schwann-Zell-ähnlichen Zellen aus Stromazellen des Knochenmarks
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Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:58 Min. • July 8th, 2025
Beginnen Sie mit einer adhärenten Kultur von Knochenmarkstromazellen.
Setzen Sie die Zellen für eine erforderliche Dauer Hypoxie aus, einem Zustand, der durch einen reduzierten Sauerstoffgehalt gekennzeichnet ist.
Isolieren Sie die Hypoxie-vorkonditionierten Zellen, zentrifugieren Sie dann und entfernen Sie den Überstand. Resuspendieren Sie die Zellen in neuronalen Vorläufermedien, die neuronale Wachstumsfaktoren enthalten.
Übertragen Sie die Zellen in eine Kulturplatte mit geringer Bindung und inkubieren Sie.
Hypoxie-Präkonditionierung und neuronale Wachstumsfaktoren induzieren die Differenzierung von Stromazellen in neuronale Vorläuferzellen.
Die Oberfläche der niedrig anhaftenden Platte hält die Vorläuferzellen in Suspension, was ihre Proliferation und Aggregation zu dreidimensionalen Neurosphären erleichtert.
Entnehmen Sie die Neurosphären, zentrifugieren Sie und entfernen Sie den Überstand. Resuspendieren Sie die Zellen in glialen Induktionsmedien, die gliaspezifische Wachstumsfaktoren enthalten.
Übertragen Sie die Neurosphären auf eine Kulturplatte, die mit Laminin, einer extrazellulären Matrixkomponente, und Poly-D-Lysin, einem positiv geladenen synthetischen Polymer, beschi
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