Differenzierung von induzierten neuralen Vorläuferzellen in Astrozyten

Nehmen Sie eine Kultur von induzierten neuralen Vorläuferzellen (iNPCs) auf einer mit extrazellulären Matrixproteinen beschichteten Multi-Well-Platte.

Ersetzen Sie das Medium durch gliale Induktionsmedien und inkubieren Sie. Wachstumsfaktoren und Hormone in den Medien erleichtern die Differenzierung von iNPCs in gliale Vorläuferzellen.

Wechseln Sie das Medium jeden zweiten Tag für die Zellproliferation. Ersetzen Sie dann das Medium durch Astrozytenmedien und inkubieren Sie.

Spezifische Nährstoffe und Wachstumsfaktoren in den Medien treiben die Differenzierung der glialen Vorläuferzellen zu Astrozyten voran.

Medienwechsel jeden zweiten Tag fördern die Reifung der Astrozyten.

Wechseln Sie das Medium auf Neuro-Diff-Medium, wenn die Zellen zu etwa 70 % konfluent sind, und wechseln Sie das Medium drei Wochen lang jeden zweiten Tag. Teilen Sie die Zellen während der Differenzierung nicht. Nach drei Wochen sollten die Zellen den neuronalen Marker TuJ1 exprimieren.

Um reifere Neuronen und neuronale Subtypen zu gewinnen, setzen Sie die Differenzierung bis zu drei Monate fort. Für die Differenzierung von iNPCs spezifisch in Richtung einer glialen Abstammungslinie wechseln Sie das Medium zu g