Eine Co-Kultur-Methode zur Modellierung von Neuron-Oligodendrozyten-Interaktionen

Nehmen wir humaninduzierte Neuronen oder iNs, die auf einer extrazellulären Matrix kultiviert werden.

Entfernen Sie das Medium und fügen Sie Verdauungsenzyme hinzu, die die Matrix aufbrechen und die Zellen dissoziieren.

Übertragen Sie die iNs in ein Röhrchen. Die Suspension wird zentrifugiert und der Überstand, der die Enzyme enthält, verworfen.

Resuspendieren Sie die iNs in einem Co-Kulturmedium und überführen Sie sie in eine Kultur mit induzierten Oligodendrozyten-Vorläuferzellen (iOPCs).

iOPCs sind Vorläufer von Oligodendrozyten, die Myelinscheiden um die Axone der Neuronen bilden.

Bei der Inkubation bilden die iOPCs synaptische Verbindungen mit den iNs. Trophische Faktoren, die von den iOPCs freigesetzt werden, und Wachstumsfaktoren im Medium fördern die iN-Reifung zu Neuronen und zeigen vermehrt zelluläre Prozesse, die synaptische Verbindungen mit anderen Neuronen bilden.

Die elektrische Aktivität der reifen Neuronen und Wachstumsfaktoren im Medium induziert die Reifung von iOPC zu Oligodendrozyten.

Die Oligodendrozyten verlängern zelluläre Prozesse und bilden Myelinscheiden um die neuronalen Axone.

Die etablierte Co-Kultur steht für die Analyse bereit.

An Tag 14 werden iOPCs